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NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9
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NRK 4xlN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Cell line · 제품 번호 500672

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 세포주는 원형 플라스미드를 형질 도입하여 정상 쥐 신장(NRK) 세포에서 유래한 클론성 안정 세포주입니다...

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01일반 정보

설명

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 세포주는 원형 플라스미드의 감염을 통해 정상 쥐 신장(NRK) 세포에서 추출한 클론 안정 세포주입니다. 이 플라스미드에는 람다 N22 RNA 결합 부위의 4번 탠덤 반복과 M9 핵 위치 신호와 융합된 3번 탠덤 반복의 mEGFP(모노머 강화 녹색 형광 단백질) 태그를 코딩하는 유전적 구조가 포함되어 있습니다. 형질전환 후 세포는 유전자 변형의 안정성을 보장하기 위해 약물 내성 선별 과정을 거쳤습니다.

이 클론 안정주에서 약 50%의 세포가 형광 마커 4xλN22-3xmEGFP-M9를 발현하여 플라스미드가 성공적으로 통합되었음을 나타냅니다. 이 마커의 발현은 mEGFP의 강력한 형광 신호에 의해 촉진되는 세포 내 과정을 실시간으로 시각화할 수 있게 해줍니다. M9 핵 국소화 신호는 발현된 융합 단백질이 핵으로 운반되도록 보장하므로 이 세포주는 핵-세포질 수송, RNA 역학 및 유전자 발현 조절을 연구하는 데 특히 유용합니다.

이 NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 세포주는 RNA 결합 단백질 상호작용, RNA 대사, 핵 수입 및 수출의 기본 메커니즘을 연구하는 연구자에게 유용합니다. MEGFP 마커의 존재는 공초점 현미경 및 라이브 세포 이미징과 같은 고급 이미징 기술을 가능하게 하여 세포 구성 요소의 공간적, 시간적 역학에 대한 상세한 통찰력을 제공합니다. 이러한 다양성에도 불구하고 세포주는 복잡한 분자 경로를 해부하고 세포 기능을 더 깊은 수준에서 이해할 수 있는 강력한 도구로 남아 있습니다.

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  • NRK 4xlN22-3xmEGFP-M9

02분류

생물체
쥐
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
방추형 모양의 섬유아세포 유사 세포

04식별자

인용
NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9(사이티온 카탈로그 번호 500672)
NCBI 세금 식별번호
10116
셀로사우루스
CVCL_AV97
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

발현된 수용체
상피세포 성장인자(EGF), 증식 촉진 활성(MSA)
단백질 발현
4xλN22-3xmEGFP-M9: 위치/유전자: 937..1009, 1066..1138, 1194.1261, 1323..1390 / 람다 펩타이드, 1462.2176, 2179.2890, 2896.3612 / mEGFP, 3612.3815 / M9-His, 5090..5884 / KanR/NeoR, 7195..584 / Pcmv
제품
BsrG1/HindIII, 네오마이신, 포스포전달효소, CMV 프로모터 사이의 M9-His 태그

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS, 0.5mg/mL G418을 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
기존 배지를 버리고 PBS로 세포를 세척합니다. 새로 준비한 0.025% 트립신/0.02% EDTA 용액을 섭씨 37도로 가열한 후 세포가 분리될 때까지 기다립니다(보통 5분 정도 소요). 신선한 배지를 추가하여 트립신을 중화한 다음 세포 혼합물을 튜브로 옮기고 원심분리합니다. 원심분리 후 상층액을 제거하고 세포 펠릿을 신선한 배지에 다시 현탁시킨 후 현탁액을 새 플라스크에 옮깁니다. G418을 배양 배지에 혼합하여 최종 농도가 0.5mg/ml가 되도록 합니다
파종 밀도
2~4 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
오스본멘델