NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Garis sel NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 adalah garis sel stabil klonal yang berasal dari sel ginjal tikus normal (NRK) melalui transfeksi plasmid melingkar. Plasmid ini mengandung konstruksi genetik yang mengkodekan empat pengulangan tandem situs pengikatan RNA lambda N22 dan tiga pengulangan tandem tag mEGFP (protein fluoresen hijau yang disempurnakan secara monomerik) yang menyatu dengan sinyal lokalisasi nuklir M9. Pasca-transfeksi, sel menjalani seleksi resistensi obat untuk memastikan stabilitas modifikasi genetik.

Sekitar 50% sel dalam garis stabil klonal ini mengekspresikan penanda fluoresen 4xλN22-3xmEGFP-M9, yang mengindikasikan keberhasilan penggabungan plasmid. Ekspresi penanda ini memungkinkan visualisasi proses intraseluler secara real-time, yang difasilitasi oleh sinyal fluoresen yang kuat dari mEGFP. Sinyal lokalisasi nuklir M9 memastikan bahwa protein fusi yang diekspresikan diangkut ke nukleus, membuat garis sel ini sangat berguna untuk mempelajari transpor nuklir-sitoplasma, dinamika RNA, dan regulasi ekspresi gen.

Garis sel NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 ini sangat berharga bagi para peneliti yang berfokus pada interaksi protein pengikat RNA, metabolisme RNA, dan mekanisme yang mendasari impor dan ekspor nuklir. Kehadiran penanda mEGFP memungkinkan teknik pencitraan canggih seperti mikroskop confocal dan pencitraan sel hidup, memberikan wawasan terperinci tentang dinamika spasial dan temporal komponen seluler. Terlepas dari keragamannya, garis sel tetap menjadi alat yang ampuh untuk membedah jalur molekuler yang kompleks dan memahami fungsi seluler pada tingkat yang lebih dalam.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami