NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞系是通过转染环形质粒从正常大鼠肾脏（NRK）细胞中获得的克隆稳定细胞系。该质粒含有编码四个串联重复的 lambda N22 RNA 结合位点和三个串联重复的融合了 M9 核定位信号的 mEGFP（单体增强型绿色荧光蛋白）标签的基因构建体。转染后，细胞进行了耐药性选择，以确保基因修饰的稳定性。

在这一克隆稳定品系中，约 50%的细胞表达荧光标记 4xλN22-3xmEGFP-M9，表明质粒的成功整合。该标记的表达可使细胞内过程实时可视化，mEGFP 强大的荧光信号也为其提供了便利。M9 核定位信号可确保表达的融合蛋白被转运到细胞核中，因此这种细胞系特别适用于研究核-细胞质转运、RNA 动态和基因表达调控。

这种 NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 细胞系对于研究 RNA 结合蛋白相互作用、RNA 代谢以及核导入和导出机制的研究人员来说非常有价值。mEGFP 标记的存在使得共聚焦显微镜和活细胞成像等先进成像技术成为可能，为细胞成分的空间和时间动态提供了详细的信息。尽管细胞系出现了变异，但它仍然是剖析复杂分子通路和深入了解细胞功能的有力工具。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。