NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Cellinjen NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 är en klonal stabil cellinje som härrör från normala råttnjurceller (NRK) genom transfektion av en cirkulär plasmid. Denna plasmid innehåller genetiska konstruktioner som kodar för fyra tandemrepetitioner av lambda N22 RNA-bindningsställen och tre tandemrepetitioner av mEGFP (monomeric enhanced green fluorescent protein) taggar fusionerade med M9 kärnlokaliseringssignal. Efter transfektion genomgick cellerna selektion för läkemedelsresistens för att säkerställa stabiliteten hos de genetiska modifieringarna.

Cirka 50% av cellerna i denna klonala stabila linje uttrycker den fluorescerande markören 4xλN22-3xmEGFP-M9, vilket indikerar en framgångsrik inkorporering av plasmiden. Uttrycket av denna markör möjliggör visualisering i realtid av intracellulära processer, vilket underlättas av den robusta fluorescerande signalen från mEGFP. M9-signalen för nukleär lokalisering säkerställer att de uttryckta fusionsproteinerna transporteras till kärnan, vilket gör denna cellinje särskilt användbar för studier av nukleär-cytoplasmisk transport, RNA-dynamik och reglering av genuttryck.

Denna NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-cellinje är värdefull för forskare som fokuserar på interaktioner mellan RNA-bindande proteiner, RNA-metabolism och de mekanismer som ligger bakom import och export till kärnan. Närvaron av mEGFP-markören möjliggör avancerade avbildningstekniker som konfokalmikroskopi och avbildning av levande celler, vilket ger detaljerade insikter i den rumsliga och tidsmässiga dynamiken hos cellkomponenter. Trots brokigheten är cellinjen fortfarande ett kraftfullt verktyg för att dissekera komplexa molekylära vägar och förstå cellfunktioner på en djupare nivå.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring