NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-solulinja on klonaalinen vakaa solulinja, joka on johdettu normaaleista rotan munuaissoluista (NRK-soluista) transfektoimalla ympyränmuotoinen plasmidi. Tämä plasmidi sisältää geneettisiä konstruktioita, jotka koodaavat neljää lambda N22 RNA:n sitoutumiskohtien tandemtoistoa ja kolme mEGFP (monomeerinen tehostettu vihreä fluoresoiva proteiini) -tunnisteiden tandemtoistoa, jotka on fuusioitu M9:n ydinalueen lokalisointisignaaliin. Transfektion jälkeen soluille tehtiin lääkeresistenssivalinta geneettisten muutosten vakauden varmistamiseksi.

Noin 50 prosenttia tämän vakaan kloonilinjan soluista ilmentää fluoresoivaa merkkiainetta 4xλN22-3xmEGFP-M9, mikä osoittaa plasmidin onnistunutta sisällyttämistä. Tämän merkkiaineen ilmentyminen mahdollistaa solunsisäisten prosessien reaaliaikaisen visualisoinnin, jota helpottaa mEGFP:n voimakas fluoresoiva signaali. M9:n ydinalueen lokalisointisignaali varmistaa, että ekspressoidut fuusioproteiinit kulkeutuvat tumaan, minkä vuoksi tämä solulinja on erityisen hyödyllinen ydin-sytoplasmakuljetuksen, RNA-dynamiikan ja geeniekspression säätelyn tutkimiseen.

Tämä NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-solulinja on arvokas tutkijoille, jotka keskittyvät RNA:ta sitovien proteiinien vuorovaikutuksiin, RNA:n metaboliaan ja ydintuonnin ja -viennin taustalla oleviin mekanismeihin. MEGFP-markkerin läsnäolo mahdollistaa kehittyneet kuvantamistekniikat, kuten konfokaalimikroskopian ja elävän solun kuvantamisen, ja antaa yksityiskohtaisen kuvan solun komponenttien alueellisesta ja ajallisesta dynamiikasta. Vaihtelusta huolimatta solulinja on edelleen tehokas väline monimutkaisten molekyylireittien tutkimiseen ja solujen toimintojen ymmärtämiseen syvemmällä tasolla.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa