NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Bunková línia NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 je klonálna stabilná bunková línia odvodená z buniek normálnych potkaních obličiek (NRK) transfekciou kruhového plazmidu. Tento plazmid obsahuje genetické konštrukty kódujúce štyri tandemové opakovania lambda N22 RNA-viažucich miest a tri tandemové opakovania mEGFP (monomérny zosilnený zelený fluorescenčný proteín) značiek spojených s jadrovým lokalizačným signálom M9. Po transfekcii sa bunky podrobili selekcii na odolnosť voči liekom, aby sa zabezpečila stabilita genetických modifikácií.

Približne 50 % buniek v tejto klonálnej stabilnej línii exprimuje fluorescenčný marker 4xλN22-3xmEGFP-M9, čo naznačuje úspešnú inkorporáciu plazmidu. Expresia tohto markera umožňuje vizualizáciu vnútrobunkových procesov v reálnom čase, ktorú uľahčuje robustný fluorescenčný signál mEGFP. Jadrový lokalizačný signál M9 zabezpečuje, že exprimované fúzne proteíny sú transportované do jadra, vďaka čomu je táto bunková línia mimoriadne užitočná na štúdium jadrovo-cytoplazmatického transportu, dynamiky RNA a regulácie génovej expresie.

Táto bunková línia NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 je cenná pre výskumníkov zameraných na interakcie proteínov viažucich RNA, metabolizmus RNA a mechanizmy, ktoré sú základom jadrového importu a exportu. Prítomnosť markera mEGFP umožňuje pokročilé zobrazovacie techniky, ako je konfokálna mikroskopia a zobrazovanie živých buniek, ktoré poskytujú podrobný pohľad na priestorovú a časovú dynamiku bunkových zložiek. Napriek pestrosti zostáva táto bunková línia výkonným nástrojom na pitvu zložitých molekulárnych dráh a pochopenie bunkových funkcií na hlbšej úrovni.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke