NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-cellelinjen er en klonal, stabil cellelinje som er avledet fra normale rottenyreceller (NRK) ved transfeksjon av et sirkulært plasmid. Dette plasmidet inneholder genetiske konstruksjoner som koder for fire tandemgjentakelser av lambda N22 RNA-bindingssteder og tre tandemgjentakelser av mEGFP (monomert forsterket grønt fluorescerende protein) som er fusjonert med M9 nukleærlokaliseringssignalet. Etter transfeksjonen ble cellene selektert for medikamentresistens for å sikre at de genetiske modifikasjonene var stabile.

Omtrent 50 % av cellene i denne stabile klonlinjen uttrykker den fluorescerende markøren 4xλN22-3xmEGFP-M9, noe som indikerer en vellykket inkorporering av plasmidet. Uttrykket av denne markøren gjør det mulig å visualisere intracellulære prosesser i sanntid, takket være det robuste fluorescerende signalet fra mEGFP. M9-signalet for nukleær lokalisering sikrer at de uttrykte fusjonsproteinene transporteres til kjernen, noe som gjør denne cellelinjen spesielt nyttig for studier av nukleær-cytoplasmatisk transport, RNA-dynamikk og regulering av genuttrykk.

Denne NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-cellelinjen er verdifull for forskere som fokuserer på RNA-bindende proteininteraksjoner, RNA-metabolisme og mekanismene som ligger til grunn for kjerneimport og -eksport. Tilstedeværelsen av mEGFP-markøren muliggjør avanserte avbildningsteknikker som konfokalmikroskopi og avbildning av levende celler, noe som gir detaljert innsikt i den romlige og tidsmessige dynamikken til cellulære komponenter. Til tross for variasjonen er cellelinjen fortsatt et kraftig verktøy for å dissekere komplekse molekylære veier og forstå cellulære funksjoner på et dypere nivå.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring