NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 ląstelių linija yra stabili kloninė ląstelių linija, gauta iš normalių žiurkių inkstų (NRK) ląstelių, perkeliant žiedinę plazmidę. Šioje plazmidėje yra genetiniai konstruktai, koduojantys keturis tandeminius lambda N22 RNR jungiančių vietų pasikartojimus ir tris tandeminius mEGFP (monomerinio sustiprinto žaliojo fluorescuojančio baltymo) ženklų pasikartojimus, sujungtus su M9 branduolio lokalizacijos signalu. Po transfekcijos ląstelėms buvo taikoma atsparumo vaistams atranka, kad būtų užtikrintas genetinių modifikacijų stabilumas.

Maždaug 50 % šios stabilios kloninės linijos ląstelių išreiškia fluorescencinį žymenį 4xλN22-3xmEGFP-M9, o tai rodo sėkmingą plazmidės inkorporavimą. Šio žymeklio raiška leidžia realiuoju laiku vizualizuoti viduląstelinius procesus, o tai palengvina tvirtas mEGFP fluorescencinis signalas. M9 branduolio lokalizacijos signalas užtikrina, kad išreikšti sintezės baltymai būtų pernešti į branduolį, todėl ši ląstelių linija ypač naudinga tiriant branduolio ir citoplazmos pernešimą, RNR dinamiką ir genų raiškos reguliavimą.

Ši NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 ląstelių linija yra vertinga mokslininkams, tyrinėjantiems RNR jungiančių baltymų sąveiką, RNR metabolizmą ir branduolinio importo bei eksporto mechanizmus. Esant mEGFP žymeniui, galima taikyti pažangius vaizdavimo metodus, tokius kaip konfokalinė mikroskopija ir gyvų ląstelių vaizdavimas, leidžiančius išsamiai įžvelgti ląstelės komponentų erdvinę ir laikinę dinamiką. Nepaisant įvairovės, ši ląstelių linija išlieka galinga priemone sudėtingiems molekuliniams keliams tirti ir ląstelės funkcijoms suprasti gilesniu lygmeniu.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime