NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9細胞株は、円形プラスミドのトランスフェクションにより、正常ラット腎臓（NRK）細胞から誘導されたクローン性安定細胞株である。このプラスミドには、λN22 RNA結合部位の4つのタンデムリピートと、M9核局在シグナルと融合したmEGFP（単量体増強緑色蛍光タンパク質）タグの3つのタンデムリピートをコードする遺伝子構築物が含まれている。トランスフェクション後、遺伝子改変の安定性を確保するため、細胞は薬剤耐性選択を受けた。

このクローン安定株では、細胞の約50％が蛍光マーカー4xλN22-3xmEGFP-M9を発現しており、プラスミドの組み込みに成功したことを示している。このマーカーの発現は、mEGFPの強固な蛍光シグナルによって、細胞内プロセスのリアルタイム可視化を可能にする。M9核局在シグナルは、発現された融合タンパク質が核に輸送されることを確実にするので、この細胞株は核-細胞質輸送、RNA動態、遺伝子発現制御の研究に特に有用である。

このNRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9細胞株は、RNA結合タンパク質相互作用、RNA代謝、核内インポートおよび核外輸送の基礎となるメカニズムに焦点を当てた研究者にとって貴重である。mEGFPマーカーの存在は、共焦点顕微鏡やライブセルイメージングなどの高度なイメージング技術を可能にし、細胞成分の空間的・時間的動態に関する詳細な洞察を提供する。多様性はあるものの、この細胞株は複雑な分子経路を解明し、細胞機能をより深いレベルで理解するための強力なツールであることに変わりはない。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。