NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

קו התאים NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 הוא קו תאים יציב משובט שמקורו בתאי כליה נורמליים של חולדה (NRK) באמצעות טרנספקציה של פלסמיד מעגלי. פלסמיד זה מכיל קונסטרוקטים גנטיים המקודדים ארבעה חזרות טנדם של אתרי קישור RNA של למבדה N22 ושלושה חזרות טנדם של תגי mEGFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר מונומרי) הממוזגים עם אות הלוקליזציה הגרעינית M9. לאחר ההעברה, התאים עברו סלקציה של עמידות לתרופות כדי להבטיח את יציבות השינויים הגנטיים.

כ-50% מהתאים בקו היציב הקלונלי הזה מבטאים את הסמן הזוהר 4xλN22-3xmEGFP-M9, המעיד על שילוב מוצלח של הפלסמיד. הביטוי של סמן זה מאפשר הדמיה בזמן אמת של תהליכים תאיים, המוקלת על ידי האות הזוהר החזק של mEGFP. אות הלוקליזציה הגרעינית M9 מבטיח שהחלבונים הממוזגים המובעים מועברים לגרעין, מה שהופך קו תאים זה לשימושי במיוחד לחקר הובלה גרעינית-ציטופלזמית, דינמיקת RNA וויסות ביטוי גנים.

קו תאים NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 זה הוא בעל ערך רב לחוקרים המתמקדים באינטראקציות של חלבונים הקושרים RNA, במטבוליזם של RNA ובמנגנונים העומדים בבסיס יבוא ויצוא גרעיניים. נוכחותו של סמן ה-mEGFP מאפשרת שימוש בטכניקות הדמיה מתקדמות כגון מיקרוסקופיה קונפוקלית והדמיה של תאים חיים, ומספקת תובנות מפורטות על הדינמיקה המרחבית והזמנית של רכיבי התא. למרות השונות, קו התאים נותר כלי רב עוצמה לניתוח מסלולים מולקולריים מורכבים ולהבנה מעמיקה יותר של תפקודי התא.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו