NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

الخط الخلوي NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 هو خط خلوي مستقر نسلي مشتق من خلايا كلية الفئران الطبيعية (NRK) من خلال نقل بلازميد دائري. يحتوي هذا البلازميد على تراكيب جينية ترميز أربعة تكرارات مترادفة لمواقع ربط الحمض النووي الريبوزي (Lambda N22) وثلاثة تكرارات مترادفة لعلامات البروتين الفلوري الأخضر المعزز الأحادي الموحّد (mEGFP) المدمج مع إشارة التوطين النووي M9. وخضعت الخلايا بعد نقل العدوى إلى الخلايا لانتقاء مقاومة الأدوية لضمان استقرار التعديلات الجينية.

يعبر ما يقرب من 50٪ من الخلايا في هذا الخط المستقر النسيلة عن العلامة الفلورية 4xλN22-3xmEGFP-M9، مما يشير إلى نجاح دمج البلازميد. ويسمح التعبير عن هذه العلامة بتصور العمليات داخل الخلايا في الوقت الحقيقي، ويسهل ذلك الإشارة الفلورية القوية ل mEGFP. تضمن إشارة التوطين النووي M9 نقل بروتينات الاندماج المعبر عنها إلى النواة، مما يجعل هذا الخط الخلوي مفيدًا بشكل خاص لدراسة النقل النووي-السيتوبلازمي وديناميكيات الحمض النووي الريبي وتنظيم التعبير الجيني.

يعتبر هذا الخط الخلوي NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 ذا قيمة للباحثين الذين يركزون على تفاعلات البروتين المرتبط بالحمض النووي الريبي واستقلاب الحمض النووي الريبي والآليات الكامنة وراء الاستيراد والتصدير النوويين. ويتيح وجود علامة mEGFP تقنيات تصوير متقدمة مثل الفحص المجهري متحد البؤر والتصوير الخلوي الحي، مما يوفر رؤى مفصلة حول الديناميكيات المكانية والزمانية للمكونات الخلوية. وعلى الرغم من التباين، يظل خط الخلية أداة قوية لتشريح المسارات الجزيئية المعقدة وفهم الوظائف الخلوية على مستوى أعمق.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان