NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Die NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-Zelllinie ist eine klonale stabile Zelllinie, die aus normalen Rattennierenzellen (NRK) durch Transfektion eines zirkulären Plasmids gewonnen wird. Dieses Plasmid enthält genetische Konstrukte, die für vier Tandem-Wiederholungen von Lambda-N22-RNA-Bindungsstellen und drei Tandem-Wiederholungen von mEGFP-Tags (monomeres, verstärkt grün fluoreszierendes Protein) kodieren, die mit dem M9-Kernlokalisierungssignal fusioniert sind. Nach der Transfektion wurden die Zellen einer Selektion auf Arzneimittelresistenz unterzogen, um die Stabilität der genetischen Veränderungen zu gewährleisten.

Etwa 50 % der Zellen in dieser klonalen stabilen Linie exprimieren den Fluoreszenzmarker 4xλN22-3xmEGFP-M9, was auf eine erfolgreiche Inkorporation des Plasmids hinweist. Die Expression dieses Markers ermöglicht eine Echtzeit-Visualisierung intrazellulärer Prozesse, die durch das robuste Fluoreszenzsignal von mEGFP erleichtert wird. Das M9-Kernlokalisierungssignal stellt sicher, dass die exprimierten Fusionsproteine in den Zellkern transportiert werden, was diese Zelllinie besonders nützlich für die Untersuchung des Kern-Zytoplasma-Transports, der RNA-Dynamik und der Regulation der Genexpression macht.

Diese NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-Zelllinie ist wertvoll für Forscher, die sich mit RNA-bindenden Protein-Interaktionen, RNA-Stoffwechsel und den Mechanismen des Kernimports und -exports beschäftigen. Das Vorhandensein des mEGFP-Markers ermöglicht fortschrittliche bildgebende Verfahren wie konfokale Mikroskopie und Live-Cell-Imaging, die detaillierte Einblicke in die räumliche und zeitliche Dynamik der zellulären Komponenten ermöglichen. Trotz der Vielfalt bleibt die Zelllinie ein leistungsfähiges Instrument für die Entschlüsselung komplexer molekularer Wege und das Verständnis zellulärer Funktionen auf einer tieferen Ebene.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung