NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-cellelinjen er en klonal stabil cellelinje, der stammer fra normale rottenyreceller (NRK) gennem transfektion af et cirkulært plasmid. Dette plasmid indeholder genetiske konstruktioner, der koder for fire tandemgentagelser af lambda N22 RNA-bindingssteder og tre tandemgentagelser af mEGFP (monomeric enhanced green fluorescent protein) tags fusioneret med M9 nuklear lokaliseringssignal. Efter transfektionen gennemgik cellerne selektion for lægemiddelresistens for at sikre stabiliteten af de genetiske modifikationer.

Ca. 50 % af cellerne i denne stabile klonlinje udtrykker den fluorescerende markør 4xλN22-3xmEGFP-M9, hvilket indikerer en vellykket inkorporering af plasmidet. Udtrykket af denne markør giver mulighed for realtidsvisualisering af intracellulære processer, hvilket lettes af det robuste fluorescerende signal fra mEGFP. M9-kernelokaliseringssignalet sikrer, at de udtrykte fusionsproteiner transporteres til kernen, hvilket gør denne cellelinje særligt nyttig til at studere nuklear-cytoplasmatisk transport, RNA-dynamik og regulering af genekspression.

Denne NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9-cellelinje er værdifuld for forskere, der fokuserer på RNA-bindende proteininteraktioner, RNA-metabolisme og de mekanismer, der ligger til grund for nuklear import og eksport. Tilstedeværelsen af mEGFP-markøren muliggør avancerede billeddannelsesteknikker som konfokal mikroskopi og levende cellebilleder, hvilket giver detaljeret indsigt i den rumlige og tidsmæssige dynamik i cellulære komponenter. På trods af variationen er cellelinjen stadig et stærkt værktøj til at dissekere komplekse molekylære veje og forstå cellulære funktioner på et dybere niveau.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring