NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Celična linija NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 je stabilna klonska celična linija, pridobljena iz normalnih celic podganje ledvice (NRK) s transfekcijo krožnega plazmida. Ta plazmid vsebuje genetske konstrukte, ki kodirajo štiri tandemske ponovitve lambda N22 RNA-vezavnih mest in tri tandemske ponovitve mEGFP (monomerni okrepljeni zeleni fluorescenčni protein), ki so združene s signalom za jedrsko lokalizacijo M9. Po transfekciji so bile celice selekcionirane na odpornost proti zdravilom, da se zagotovi stabilnost genskih sprememb.

Približno 50 % celic v tej stabilni klonski liniji izraža fluorescenčni označevalec 4xλN22-3xmEGFP-M9, kar kaže na uspešno vključitev plazmida. Izražanje tega označevalca omogoča vizualizacijo znotrajceličnih procesov v realnem času, kar omogoča močan fluorescenčni signal mEGFP. Signal jedrske lokalizacije M9 zagotavlja, da se izraženi fuzijski proteini prenašajo v jedro, zato je ta celična linija še posebej uporabna za preučevanje jedrsko-citoplazmatskega prenosa, dinamike RNK in regulacije izražanja genov.

Ta celična linija NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 je dragocena za raziskovalce, ki se osredotočajo na interakcije med beljakovinami, ki vežejo RNA, presnovo RNA ter mehanizme, na katerih temeljita uvoz in izvoz iz jedra. Prisotnost označevalca mEGFP omogoča napredne tehnike slikanja, kot sta konfokalna mikroskopija in slikanje živih celic, kar omogoča podroben vpogled v prostorsko in časovno dinamiko celičnih komponent. Kljub spremenljivosti celična linija ostaja močno orodje za razčlenjevanje zapletenih molekularnih poti in razumevanje celičnih funkcij na globlji ravni.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo