NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 rakuliin on klonaalne stabiilne rakuliin, mis on saadud normaalsete rottide neerude (NRK) rakkudest ringikujulise plasmiidi transfektsiooni teel. See plasmiid sisaldab geneetilisi konstruktsioone, mis kodeerivad neli tandemkordust lambda N22 RNA sidumiskohti ja kolm tandemkordust mEGFP (monomeeriline tugevdatud roheline fluorestseeruv valk) märgist, mis on fikseeritud M9 tuuma lokaliseerimissignaaliga. Pärast transfektsiooni läbisid rakud ravimresistentsuse valiku, et tagada geneetiliste modifikatsioonide stabiilsus.

Ligikaudu 50% selle klonaalse stabiilse liini rakkudest ekspresseerib fluorestseerivat markerit 4xλN22-3xmEGFP-M9, mis näitab plasmiidi edukat inkorporeerimist. Selle markeri ekspressioon võimaldab rakusiseste protsesside visualiseerimist reaalajas, mida hõlbustab mEGFP tugev fluorestseeruv signaal. M9 tuuma lokaliseerimissignaal tagab, et ekspresseeritud fusioonivalgud transporditakse tuumasse, mistõttu on see rakuliin eriti kasulik tuuma-sütoplasma transpordi, RNA dünaamika ja geeniekspressiooni regulatsiooni uurimiseks.

See NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 rakuliin on väärtuslik teadlastele, kes keskenduvad RNA-siduva valgu interaktsioonidele, RNA metabolismile ning tuumaimpordi ja -ekspordi aluseks olevatele mehhanismidele. MEGFP-markeri olemasolu võimaldab täiustatud pildistamistehnikaid, nagu konfokaalmikroskoopia ja elusraku pildistamine, mis annab üksikasjaliku ülevaate rakukomponentide ruumilisest ja ajalisest dünaamikast. Vaatamata varieerumisele jääb rakuliin võimsaks vahendiks keeruliste molekulaarsete radade lahtimõtestamiseks ja raku funktsioonide sügavamal tasandil mõistmiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest