NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

Η κυτταρική σειρά NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 είναι μια κλωνική σταθερή κυτταρική σειρά που προέρχεται από κύτταρα φυσιολογικών νεφρών αρουραίου (NRK) μέσω της διαμόλυνσης ενός κυκλικού πλασμιδίου. Αυτό το πλασμίδιο περιέχει γενετικές κατασκευές που κωδικοποιούν τέσσερις επαναλήψεις tandem των θέσεων πρόσδεσης RNA του lambda N22 και τρεις επαναλήψεις tandem των ετικετών mEGFP (μονομερής ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη), συγχωνευμένες με το σήμα πυρηνικού εντοπισμού M9. Μετά τη μεταμόσχευση, τα κύτταρα υποβλήθηκαν σε επιλογή ανθεκτικότητας σε φάρμακα για να εξασφαλιστεί η σταθερότητα των γενετικών τροποποιήσεων.

Περίπου το 50% των κυττάρων αυτής της σταθερής κλωνικής σειράς εκφράζουν τον φθορίζοντα δείκτη 4xλN22-3xmEGFP-M9, υποδεικνύοντας την επιτυχή ενσωμάτωση του πλασμιδίου. Η έκφραση αυτού του δείκτη επιτρέπει την οπτικοποίηση σε πραγματικό χρόνο των ενδοκυτταρικών διεργασιών, η οποία διευκολύνεται από το ισχυρό φθορίζον σήμα του mEGFP. Το σήμα πυρηνικού εντοπισμού M9 εξασφαλίζει ότι οι εκφραζόμενες πρωτεΐνες σύντηξης μεταφέρονται στον πυρήνα, καθιστώντας αυτή την κυτταρική σειρά ιδιαίτερα χρήσιμη για τη μελέτη της πυρηνικής-κυτταροπλασματικής μεταφοράς, της δυναμικής του RNA και της ρύθμισης της γονιδιακής έκφρασης.

Αυτή η κυτταρική σειρά NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 είναι πολύτιμη για ερευνητές που εστιάζουν στις αλληλεπιδράσεις πρωτεϊνών που δεσμεύουν RNA, στον μεταβολισμό του RNA και στους μηχανισμούς που διέπουν την πυρηνική εισαγωγή και εξαγωγή. Η παρουσία του δείκτη mEGFP επιτρέπει προηγμένες τεχνικές απεικόνισης, όπως η συνεστιακή μικροσκοπία και η απεικόνιση ζωντανών κυττάρων, παρέχοντας λεπτομερή εικόνα της χωρικής και χρονικής δυναμικής των κυτταρικών συστατικών. Παρά την ποικιλομορφία, η κυτταρική σειρά παραμένει ένα ισχυρό εργαλείο για την ανάλυση πολύπλοκων μοριακών μονοπατιών και την κατανόηση των κυτταρικών λειτουργιών σε βαθύτερο επίπεδο.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης