NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

สายพันธุ์เซลล์ NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 เป็นสายพันธุ์เซลล์โคลนที่เสถียรซึ่งได้มาจากเซลล์ไตของหนูปกติ (NRK) ผ่านการถ่ายโอนพลาสมิดวงกลม พลาสมิดนี้ประกอบด้วยโครงสร้างทางพันธุกรรมที่เข้ารหัสตำแหน่งจับ RNA ของ lambda N22 ซ้ำกันสี่ตำแหน่งแบบเรียงต่อกัน และแท็ก mEGFP (โปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่เพิ่มประสิทธิภาพแบบโมโนเมอร์) ซ้ำกันสามตำแหน่งแบบเรียงต่อกัน ซึ่งเชื่อมต่อกับสัญญาณการกำหนดตำแหน่งในนิวเคลียส M9หลังจากการถ่ายโอนยีน เซลล์ได้รับการคัดเลือกให้ต้านทานยาเพื่อให้มั่นใจในความเสถียรของการดัดแปลงทางพันธุกรรม

ประมาณ 50% ของเซลล์ในสายพันธุ์คงที่โคลนนี้แสดงเครื่องหมายเรืองแสง 4xλN22-3xmEGFP-M9 ซึ่งบ่งชี้ว่ามีการนำพลาสมิดเข้าสู่เซลล์ได้สำเร็จการแสดงออกของตัวบ่งชี้นี้ช่วยให้สามารถมองเห็นกระบวนการภายในเซลล์แบบเรียลไทม์ได้ โดยอาศัยสัญญาณเรืองแสงที่แข็งแกร่งของ mEGFP สัญญาณการเคลื่อนที่เข้าสู่แกนกลางของ M9 ช่วยให้โปรตีนฟิวชั่นที่ถูกแสดงออกถูกขนส่งไปยังนิวเคลียส ทำให้สายพันธุ์เซลล์นี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการขนส่งระหว่างนิวเคลียสและไซโทพลาซึม การเคลื่อนไหวของ RNA และการควบคุมการแสดงออกของยีน

เซลล์ไลน์ NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 นี้มีคุณค่าสำหรับนักวิจัยที่มุ่งเน้นการศึกษาปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนกับ RNA, การเผาผลาญ RNA และกลไกพื้นฐานของการนำเข้าและส่งออกนิวเคลียสการมีอยู่ของตัวบ่งชี้ mEGFP ช่วยให้สามารถใช้วิธีการถ่ายภาพขั้นสูง เช่น การส่องกล้องคอนโฟคอลและการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิต ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกอย่างละเอียดเกี่ยวกับพลวัตเชิงพื้นที่และเชิงเวลาขององค์ประกอบเซลล์ แม้จะมีความหลากหลาย แต่สายเซลล์นี้ยังคงเป็นเครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการวิเคราะห์เส้นทางโมเลกุลที่ซับซ้อนและทำความเข้าใจหน้าที่ของเซลล์ในระดับที่ลึกยิ่งขึ้น

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.