NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9

NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 hücre hattı, dairesel bir plazmidin transfeksiyonu yoluyla normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinden türetilen klonal stabil bir hücre hattıdır. Bu plazmid, lambda N22 RNA bağlama bölgelerinin dört tandem tekrarını ve M9 nükleer lokalizasyon sinyali ile kaynaşmış mEGFP (monomerik geliştirilmiş yeşil floresan protein) etiketlerinin üç tandem tekrarını kodlayan genetik yapılar içerir. Transfeksiyon sonrası, genetik modifikasyonların stabilitesini sağlamak için hücreler ilaç direnci seçimine tabi tutulmuştur.

Bu klonal stabil hattaki hücrelerin yaklaşık %50'si floresan işaretleyici 4xλN22-3xmEGFP-M9'u ifade ederek plazmidin başarılı bir şekilde dahil edildiğini göstermektedir. Bu işaretleyicinin ifadesi, mEGFP'nin güçlü floresan sinyali ile kolaylaştırılan hücre içi süreçlerin gerçek zamanlı olarak görselleştirilmesine olanak tanır. M9 nükleer lokalizasyon sinyali, eksprese edilen füzyon proteinlerinin çekirdeğe taşınmasını sağlayarak bu hücre hattını nükleer-sitoplazmik taşıma, RNA dinamikleri ve gen ekspresyonu düzenlemesini incelemek için özellikle kullanışlı hale getirir.

Bu NRK-4xlambdaN22-3xmEGFP-M9 hücre hattı, RNA-bağlayıcı protein etkileşimleri, RNA metabolizması ve nükleer ithalat ve ihracatın altında yatan mekanizmalara odaklanan araştırmacılar için değerlidir. MEGFP işaretleyicisinin varlığı, konfokal mikroskopi ve canlı hücre görüntüleme gibi gelişmiş görüntüleme tekniklerini mümkün kılarak hücresel bileşenlerin uzamsal ve zamansal dinamikleri hakkında ayrıntılı bilgiler sağlar. Renk değişimine rağmen, hücre hattı karmaşık moleküler yolakları incelemek ve hücresel işlevleri daha derin bir düzeyde anlamak için güçlü bir araç olmaya devam etmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın