NRK-EGFP-H2B
Cell line · Référence du produit 500724
La lignée cellulaire NRK-EGFP-H2B est une variante génétiquement modifiée de cellules rénales normales de rat (NRK) qui expriment de manière stable la protéine fluorescente verte améliorée (...
Personnalisation / Recommandations
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Informations générales
- Description
La lignée cellulaire NRK-EGFP-H2B est une variante génétiquement modifiée des cellules rénales normales de rat (NRK) qui expriment de façon stable la protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) fusionnée à l'histone H2B. Cette modification permet de visualiser en temps réel la chromatine et la dynamique nucléaire, ce qui fait de cette lignée cellulaire un outil précieux pour l'étude de la progression du cycle cellulaire, de la mitose et de l'organisation de la chromatine. L'expression stable d'EGFP-H2B fournit un signal fluorescent brillant et constant, facilitant l'imagerie à haute résolution des cellules vivantes et permettant aux chercheurs de suivre les événements nucléaires avec une grande précision.
Les cellules NRK, qui proviennent du tissu rénal d'un rat adulte, sont largement utilisées en biologie cellulaire en raison de leurs caractéristiques de croissance robustes et de leurs comportements physiologiques bien documentés. L'introduction de la protéine de fusion EGFP-H2B dans ces cellules ne modifie pas de manière significative leur croissance ou leur morphologie, ce qui permet d'obtenir des conditions expérimentales fiables et reproductibles. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile pour l'étude de la biologie des cellules rénales, des réponses cellulaires au stress et des mécanismes de la cancérogenèse, étant donné le rôle du rein dans la filtration du sang et l'excrétion des déchets. En outre, les capacités de fluorescence des cellules NRK-EGFP-H2B peuvent être exploitées dans des applications de criblage de médicaments afin d'observer en temps réel les effets des médicaments sur la prolifération cellulaire et la morphologie nucléaire.
- Tissu
- Rein
- Synonymes
- NRK EGFP-H2B
02Classification
- Organisme
- Rat
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- Cellules de forme fusiforme ressemblant à des fibroblastes
04Identifiants
- Référence
- NRK-EGFP-H2B (numéro de catalogue Cytion 500724)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV92
- Déposant
- Le laboratoire Ellenberg (EMBL)
05Expression et sensibilité
- Récepteurs exprimés
- Facteur de croissance épidermique (EGF), activité stimulant la multiplication (MSA)
- Expression des protéines
- EGFP-H2B : Localisation/Gène : 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Produits
- Facteur de croissance épidermique (EGF), activité stimulant la multiplication (MSA), promoteur CMV Histone H2B, Néomycine, Phosphotransférase
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 0,5 mg/mL de G418
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Jeter l'ancien milieu et laver les cellules avec du PBS. Ajouter une solution fraîchement préparée de 0,025 % de trypsine/0,02 % d'EDTA chauffée à 37 degrés Celsius et attendre que les cellules se détachent, ce qui prend généralement environ 5 minutes. Neutraliser la trypsine en ajoutant du milieu frais, puis transférer le mélange de cellules dans un tube et centrifuger. Après centrifugation, éliminer le surnageant, remettre le culot cellulaire en suspension dans du milieu de culture frais et transférer la suspension dans de nouveaux flacons. Incorporer G418 dans le milieu de culture pour obtenir une concentration finale de 0,5 mg/ml
- Densité de semis
- 2 à 4 x 104 cellules/cm2
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Race / sous-espèce
- OsborneMendel
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Avertissement
- Nos cellules sont fournies exclusivement à des fins de recherche in vitro en laboratoire et ne sont pas destinées à un usage clinique ou diagnostique, ni à être administrées à des êtres humains ou utilisées à des fins vétérinaires. Les utilisateurs doivent se conformer à toutes les directives et réglementations applicables à la manipulation et à l'utilisation de ces cellules dans un cadre de recherche.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Les accords conclus avec des tiers s'appliquent
- Oui
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