NRK-EGFP-H2B

La línea celular NRK-EGFP-H2B es una variante modificada genéticamente de las células normales de riñón de rata (NRK) que expresa de forma estable la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) fusionada a la histona H2B. Esta modificación permite la visualización en tiempo real de la cromatina y la dinámica nuclear, lo que convierte a esta línea celular en una herramienta inestimable para estudiar la progresión del ciclo celular, la mitosis y la organización de la cromatina. La expresión estable de EGFP-H2B proporciona una señal fluorescente brillante y consistente, facilitando la obtención de imágenes de alta resolución de células vivas y permitiendo a los investigadores monitorizar los eventos nucleares con gran precisión.

Las células NRK, procedentes del tejido renal de una rata adulta, se utilizan ampliamente en biología celular debido a sus robustas características de crecimiento y a sus comportamientos fisiológicos bien documentados. La introducción de la proteína de fusión EGFP-H2B en estas células no altera significativamente su crecimiento o morfología, lo que permite condiciones experimentales fiables y reproducibles. Esta línea celular es especialmente útil en estudios de biología celular renal, respuestas celulares al estrés y mecanismos de carcinogénesis, dado el papel del riñón en el filtrado de la sangre y la excreción de residuos. Además, las capacidades de fluorescencia de las células NRK-EGFP-H2B pueden aprovecharse en aplicaciones de cribado de fármacos para observar en tiempo real los efectos de éstos sobre la proliferación celular y la morfología nuclear.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía