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NRK-EGFP-H2B
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NRK EGFP-H2B

NRK-EGFP-H2B

Cell line · 제품 번호 500724

NRK-EGFP-H2B 세포주는 정상 쥐 신장(NRK) 세포를 유전자 조작하여 만든 변이체로, 강화형 녹색 형광 단백질(...

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1

01일반 정보

설명

NRK-EGFP-H2B 세포주는 히스톤 H2B에 융합된 강화된 녹색 형광 단백질(EGFP)을 안정적으로 발현하는 정상 쥐 신장(NRK) 세포의 유전자 변형 변종입니다. 이러한 변형으로 염색질과 핵 역학을 실시간으로 시각화할 수 있어 이 세포주는 세포 주기 진행, 유사 분열 및 염색질 조직을 연구하는 데 매우 유용한 도구가 됩니다. EGFP-H2B의 안정적인 발현은 밝고 일관된 형광 신호를 제공하여 고해상도 라이브 세포 이미징을 용이하게 하고 연구자들이 핵 이벤트를 매우 정밀하게 모니터링할 수 있게 해줍니다.

성인 쥐의 신장 조직에서 유래한 NRK 세포는 강력한 성장 특성과 잘 문서화된 생리적 행동으로 인해 세포 생물학에서 널리 사용되고 있습니다. 이 세포에 EGFP-H2B 융합 단백질을 도입해도 세포의 성장이나 형태가 크게 변하지 않으므로 신뢰할 수 있고 재현 가능한 실험 조건을 만들 수 있습니다. 이 세포주는 혈액을 걸러내고 노폐물을 배설하는 신장의 역할을 고려할 때 신장 세포 생물학, 스트레스에 대한 세포 반응, 발암 메커니즘 연구에 특히 유용합니다. 또한 NRK-EGFP-H2B 세포의 형광 기능은 약물 스크리닝 애플리케이션에 활용되어 세포 증식과 핵 형태에 대한 약물 효과를 실시간으로 관찰할 수 있습니다.

티슈
신장
동의어
  • NRK EGFP-H2B

02분류

생물체
쥐
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
방추형 모양의 섬유아세포 유사 세포

04식별자

인용
NRK-EGFP-H2B(사이티온 카탈로그 번호 500724)
NCBI 세금 식별번호
10116
셀로사우루스
CVCL_AV92
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

발현된 수용체
상피세포 성장인자(EGF), 증식 촉진 활성(MSA)
단백질 발현
EGFP-H2B: 위치/유전자: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
제품
표피 성장 인자(EGF), 증식 자극 활성(MSA), CMV 프로모터 히스톤 H2B, 네오마이신, 포스포트랜스퍼라제

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
배지에 10% FBS, 0.5mg/mL G418을 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
기존 배지를 버리고 PBS로 세포를 세척합니다. 새로 준비한 0.025% 트립신/0.02% EDTA 용액을 섭씨 37도로 가열한 후 세포가 분리될 때까지 기다립니다(보통 5분 정도 소요). 신선한 배지를 추가하여 트립신을 중화한 다음 세포 혼합물을 튜브로 옮기고 원심분리합니다. 원심분리 후 상층액을 제거하고 세포 펠릿을 신선한 배지에 다시 현탁시킨 후 현탁액을 새 플라스크에 옮깁니다. G418을 배양 배지에 혼합하여 최종 농도가 0.5mg/ml가 되도록 합니다
파종 밀도
2~4 × 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
오스본멘델