NRK-EGFP-H2B
Cell line · Produktnummer 500724
Cellinjen NRK-EGFP-H2B är en genetiskt modifierad variant av normala råttnjurceller (NRK) som stabilt uttrycker det förstärkta gröna fluorescerande proteinet (...
Anpassning / Rekommendationer
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Allmän information
- Beskrivning
Cellinjen NRK-EGFP-H2B är en genetiskt modifierad variant av NRK-celler (Normal Rat Kidney) som stabilt uttrycker EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein) fusionerat med histon H2B. Denna modifiering möjliggör visualisering i realtid av kromatin och kärndynamik, vilket gör denna cellinje till ett ovärderligt verktyg för att studera cellcykelprogression, mitos och kromatinorganisation. Det stabila uttrycket av EGFP-H2B ger en ljus och konsekvent fluorescerande signal, vilket underlättar högupplöst avbildning av levande celler och gör det möjligt för forskare att övervaka nukleära händelser med stor precision.
NRK-celler, som härstammar från njurvävnaden hos en vuxen råtta, används ofta inom cellbiologi på grund av sina robusta tillväxtegenskaper och väldokumenterade fysiologiska beteenden. Införandet av fusionsproteinet EGFP-H2B i dessa celler förändrar inte nämnvärt deras tillväxt eller morfologi, vilket möjliggör tillförlitliga och reproducerbara experimentella förhållanden. Denna cellinje är särskilt användbar i studier av njurcellsbiologi, cellulära reaktioner på stress och mekanismer för cancerframkallande, med tanke på njurarnas roll när det gäller att filtrera blod och utsöndra avfall. Dessutom kan fluorescensförmågan hos NRK-EGFP-H2B-celler utnyttjas vid läkemedelsscreening för att observera läkemedelseffekter på cellproliferation och nukleär morfologi i realtid.
- Vävnad
- Njurar
- Synonymer
- NRK EGFP-H2B
02Klassificering
- Organism
- Råtta
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Fibroblastliknande celler med fusiform form
04Identifierare
- Källa
- NRK-EGFP-H2B (Cytion katalognummer 500724)
- NCBI-skattenummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV92
- Insättare
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- Epidermal tillväxtfaktor (EGF), multiplikationsstimulerande aktivitet (MSA)
- Proteinexpression
- EGFP-H2B: Plats/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Produkter
- Epidermal tillväxtfaktor (EGF), multiplikationsstimulerande aktivitet (MSA), CMV Promotor Histone H2B, Neomycin, Fosfotransferas
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS, 0,5 mg/ml G418
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Kassera det gamla mediet och tvätta cellerna med PBS. Tillsätt en nyberedd 0,025% trypsin/0,02% EDTA-lösning som värmts upp till 37 grader Celsius och vänta tills cellerna lossnar, vilket vanligtvis tar cirka 5 minuter. Neutralisera trypsinet genom att tillsätta färskt medium, överför sedan cellblandningen till ett rör och centrifugera. Efter centrifugeringen avlägsnas supernatanten, cellpelleten resuspenderas i färskt odlingsmedium och suspensionen överförs till nya kolvar. Tillsätt G418 i odlingsmediet för att uppnå en slutlig koncentration på 0,5 mg/ml
- Såtäthet
- 2 till 4 x 104 celler/cm2
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Ras / underart
- OsborneMendel
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Ansvarsfriskrivning
- Våra celler tillhandahålls uteslutande för in vitro-laboratorieforskning och är inte avsedda för klinisk eller diagnostisk användning, och de ska inte heller administreras till människor eller användas för veterinära ändamål. Användare måste följa alla tillämpliga riktlinjer och föreskrifter för hantering och användning av dessa celler i en forskningsmiljö.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja
.jpg)