NRK-EGFP-H2B
Cell line · Αριθμός προϊόντος 500724
Η κυτταρική σειρά NRK-EGFP-H2B είναι μια γενετικά τροποποιημένη παραλλαγή φυσιολογικών νεφρικών κυττάρων αρουραίου (NRK) που εκφράζουν σταθερά την ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη (...
Προσαρμογή / Προτάσεις
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Η κυτταρική σειρά NRK-EGFP-H2B είναι μια γενετικά τροποποιημένη παραλλαγή των φυσιολογικών νεφρικών κυττάρων αρουραίου (NRK) που εκφράζουν σταθερά την ενισχυμένη πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη (EGFP) συνδεδεμένη με την ιστόνη H2B. Αυτή η τροποποίηση επιτρέπει την οπτικοποίηση σε πραγματικό χρόνο της χρωματίνης και της πυρηνικής δυναμικής, καθιστώντας αυτή την κυτταρική σειρά ένα ανεκτίμητο εργαλείο για τη μελέτη της εξέλιξης του κυτταρικού κύκλου, της μίτωσης και της οργάνωσης της χρωματίνης. Η σταθερή έκφραση του EGFP-H2B παρέχει ένα φωτεινό και σταθερό φθορίζον σήμα, διευκολύνοντας την απεικόνιση ζωντανών κυττάρων υψηλής ανάλυσης και επιτρέποντας στους ερευνητές να παρακολουθούν τα πυρηνικά συμβάντα με μεγάλη ακρίβεια.
Τα κύτταρα NRK, που προέρχονται από τον νεφρικό ιστό ενός ενήλικου αρουραίου, χρησιμοποιούνται ευρέως στην κυτταρική βιολογία λόγω των ισχυρών χαρακτηριστικών ανάπτυξης και των καλά τεκμηριωμένων φυσιολογικών συμπεριφορών τους. Η εισαγωγή της πρωτεΐνης σύντηξης EGFP-H2B σε αυτά τα κύτταρα δεν μεταβάλλει σημαντικά την ανάπτυξη ή τη μορφολογία τους, επιτρέποντας αξιόπιστες και αναπαραγώγιμες πειραματικές συνθήκες. Αυτή η κυτταρική σειρά είναι ιδιαίτερα χρήσιμη σε μελέτες της βιολογίας των νεφρικών κυττάρων, των κυτταρικών αποκρίσεων στο στρες και των μηχανισμών καρκινογένεσης, δεδομένου του ρόλου του νεφρού στο φιλτράρισμα του αίματος και την αποβολή των αποβλήτων. Επιπλέον, οι δυνατότητες φθορισμού των κυττάρων NRK-EGFP-H2B μπορούν να αξιοποιηθούν σε εφαρμογές διαλογής φαρμάκων για την παρατήρηση των επιδράσεων των φαρμάκων στον κυτταρικό πολλαπλασιασμό και τη μορφολογία του πυρήνα σε πραγματικό χρόνο.
- Ιστός
- Νεφρός
- Συνώνυμα
- NRK EGFP-H2B
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Αρουραίος
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Κύτταρα που μοιάζουν με ινοβλάστες και έχουν φουσκοειδές σχήμα
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- NRK-EGFP-H2B (αριθμός καταλόγου Cytion 500724)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 10116
- Κελλοσαύρος
- CVCL_AV92
- Καταθέτης
- Εργαστήριο Ellenberg (EMBL)
05Έκφραση και ευαισθησία
- Υποδοχείς που εκφράζονται
- Επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF), δραστηριότητα διέγερσης του πολλαπλασιασμού (MSA)
- Έκφραση πρωτεϊνών
- EGFP-H2B: Θέση/γονίδιο: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Προϊόντα
- Επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF), δραστηριότητα διέγερσης του πολλαπλασιασμού (MSA), CMV Promotor ιστόνη H2B, νεομυκίνη, φωσφοτρανσφεράση
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Απορρίψτε το παλιό μέσο και πλύνετε τα κύτταρα με PBS. Προσθέστε ένα φρεσκοπαρασκευασμένο διάλυμα θρυψίνης 0,025%/0,02% EDTA θερμαινόμενο στους 37 βαθμούς Κελσίου και περιμένετε μέχρι να αποκολληθούν τα κύτταρα, το οποίο συνήθως διαρκεί περίπου 5 λεπτά. Εξουδετερώστε τη θρυψίνη προσθέτοντας φρέσκο μέσο, στη συνέχεια μεταφέρετε το μείγμα κυττάρων σε ένα σωληνάριο και φυγοκεντρίστε. Μετά τη φυγοκέντρηση, αφαιρέστε το υπερκείμενο υγρό, ανασυσταθείτε το κυτταρικό σφαιρίδιο σε φρέσκο μέσο καλλιέργειας και μεταφέρετε το εναιώρημα σε νέες φιάλες. Ενσωματώστε το G418 στο μέσο καλλιέργειας ώστε να επιτευχθεί τελική συγκέντρωση 0,5 mg/ml
- Πυκνότητα σποράς
- 2 έως 4 x 104 κύτταρα/cm2
- Ανανέωση υγρών
- 2 έως 3 φορές την εβδομάδα
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Φυλή / υποείδος
- OsborneMendel
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Αποποίηση ευθύνης
- Τα κύτταρά μας παρέχονται αποκλειστικά για εργαστηριακούς ερευνητικούς σκοπούς in vitro και δεν προορίζονται για κλινική ή διαγνωστική χρήση, ούτε πρόκειται να χορηγηθούν σε ανθρώπους ή να χρησιμοποιηθούν για κτηνιατρικούς σκοπούς. Οι χρήστες πρέπει να τηρούν όλες τις ισχύουσες οδηγίες και κανονισμούς για το χειρισμό και τη χρήση αυτών των κυττάρων σε ερευνητικό περιβάλλον.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Ισχύουν συμφωνίες με τρίτους
- Ναι
.jpg)