NRK-EGFP-H2B
Cell line · Artikelnummer 500724
Die NRK-EGFP-H2B-Zelllinie ist eine genetisch veränderte Variante normaler Rattennierenzellen (NRK), die das Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) stabil exprimieren (...
Anpassung / Empfehlungen
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Die NRK-EGFP-H2B-Zelllinie ist eine genetisch veränderte Variante normaler Rattennierenzellen (NRK), die das mit Histon H2B fusionierte grün fluoreszierende Protein (EGFP) stabil exprimieren. Diese Modifikation ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung von Chromatin und Kerndynamik und macht diese Zelllinie zu einem unschätzbaren Werkzeug für die Untersuchung der Zellzyklusprogression, der Mitose und der Chromatinorganisation. Die stabile Expression von EGFP-H2B liefert ein helles und konsistentes Fluoreszenzsignal, das die hochauflösende Bildgebung in lebenden Zellen erleichtert und es den Forschern ermöglicht, nukleare Ereignisse mit großer Präzision zu verfolgen.
NRK-Zellen, die aus dem Nierengewebe erwachsener Ratten stammen, werden aufgrund ihrer robusten Wachstumseigenschaften und ihres gut dokumentierten physiologischen Verhaltens häufig in der Zellbiologie eingesetzt. Die Einführung des EGFP-H2B-Fusionsproteins in diese Zellen verändert ihr Wachstum oder ihre Morphologie nicht wesentlich, so dass zuverlässige und reproduzierbare Versuchsbedingungen möglich sind. Angesichts der Rolle der Niere bei der Blutfilterung und der Ausscheidung von Abfallstoffen ist diese Zelllinie besonders nützlich für die Untersuchung der Nierenzellbiologie, der zellulären Reaktionen auf Stress und der Mechanismen der Karzinogenese. Darüber hinaus können die Fluoreszenzfähigkeiten von NRK-EGFP-H2B-Zellen beim Wirkstoffscreening genutzt werden, um die Auswirkungen von Medikamenten auf die Zellproliferation und die Kernmorphologie in Echtzeit zu beobachten.
- Gewebe
- Niere
- Synonyme
- NRK EGFP-H2B
02Klassifizierung
- Organismus
- Ratte
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Fibroblastenähnliche Zellen mit fusiformer Form
04Bezeichner
- Quellenangabe
- NRK-EGFP-H2B (Cytion-Katalognummer 500724)
- NCBI-Steuer-ID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV92
- Einleger
- Das Ellenberg-Labor (EMBL)
05Expression und Anfälligkeit
- Exprimierte Rezeptoren
- Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Multiplikationsstimulierende Aktivität (MSA)
- Proteinexpression
- EGFP-H2B: Standort/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Produkte
- Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), Multiplikationsstimulierende Aktivität (MSA), CMV-Promotor Histon H2B, Neomycin, Phosphotransferase
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS, 0,5 mg/mL G418
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Verwerfen Sie das alte Medium und waschen Sie die Zellen mit PBS. Geben Sie eine frisch zubereitete, auf 37 Grad Celsius erhitzte 0,025%ige Trypsin/0,02%ige EDTA-Lösung hinzu und warten Sie, bis sich die Zellen ablösen, was in der Regel etwa 5 Minuten dauert. Neutralisieren Sie das Trypsin durch Zugabe von frischem Medium, überführen Sie das Zellgemisch in ein Röhrchen und zentrifugieren Sie es. Nach der Zentrifugation den Überstand abnehmen, das Zellpellet in frischem Kulturmedium resuspendieren und die Suspension in neue Kolben überführen. G418 in das Kulturmedium einbringen, um eine Endkonzentration von 0,5 mg/ml zu erreichen
- Aussaatdichte
- 2 bis 4 x 104 Zellen/cm2
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Rasse / Unterart
- OsborneMendel
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Haftungsausschluss
- Unsere Zellen werden ausschließlich für In-vitro-Laborforschungszwecke zur Verfügung gestellt und sind nicht für den klinischen oder diagnostischen Gebrauch bestimmt. Sie dürfen auch nicht an Menschen verabreicht oder für tierärztliche Zwecke verwendet werden. Die Nutzer müssen alle geltenden Richtlinien und Vorschriften für die Handhabung und Verwendung dieser Zellen in der Forschung einhalten.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Es gelten Vereinbarungen mit Dritten
- Ja
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