NRK-EGFP-H2B
Cell line · Ürün numarası 500724
NRK-EGFP-H2B hücre hattı, normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinin, güçlendirilmiş yeşil floresan proteinini istikrarlı bir şekilde eksprese eden genetik olarak değiştirilmiş bir varyantıdır (...
Kişiselleştirme / Öneriler
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Genel bilgiler
- Açıklama
NRK-EGFP-H2B hücre hattı, histon H2B'ye kaynaşmış gelişmiş yeşil floresan proteini (EGFP) kararlı bir şekilde ifade eden normal sıçan böbrek (NRK) hücrelerinin genetik olarak değiştirilmiş bir çeşididir. Bu modifikasyon, kromatin ve nükleer dinamiklerin gerçek zamanlı görselleştirilmesine olanak tanıyarak bu hücre hattını hücre döngüsü ilerlemesi, mitoz ve kromatin organizasyonunu incelemek için paha biçilmez bir araç haline getirir. EGFP-H2B'nin kararlı ifadesi parlak ve tutarlı bir floresan sinyali sağlayarak yüksek çözünürlüklü canlı hücre görüntülemeyi kolaylaştırır ve araştırmacıların nükleer olayları büyük bir hassasiyetle izlemelerine olanak tanır.
Yetişkin bir sıçanın böbrek dokusundan köken alan NRK hücreleri, sağlam büyüme özellikleri ve iyi belgelenmiş fizyolojik davranışları nedeniyle hücresel biyolojide yaygın olarak kullanılmaktadır. EGFP-H2B füzyon proteininin bu hücrelere eklenmesi, büyümelerini veya morfolojilerini önemli ölçüde değiştirmez, güvenilir ve tekrarlanabilir deneysel koşullara izin verir. Bu hücre hattı, böbreğin kanı filtreleme ve atıkları dışarı atma rolü göz önüne alındığında, böbrek hücresi biyolojisi, strese karşı hücresel tepkiler ve karsinogenez mekanizmaları çalışmalarında özellikle yararlıdır. Ayrıca, NRK-EGFP-H2B hücrelerinin floresan özellikleri, hücre çoğalması ve nükleer morfoloji üzerindeki ilaç etkilerini gerçek zamanlı olarak gözlemlemek için ilaç tarama uygulamalarında kullanılabilir.
- Doku
- Böbrek
- Eş anlamlılar
- NRK EGFP-H2B
02Sınıflandırma
- Canlı
- Sıçan
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Fusiform şekilli fibroblast benzeri hücreler
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- NRK-EGFP-H2B (Cytion katalog numarası 500724)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV92
- Mevduat sahibi
- Ellenberg Laboratuvarı (EMBL)
05İfade ve duyarlılık
- Eksprese edilen reseptörler
- Epidermal büyüme faktörü (EGF), çoğalmayı uyarıcı aktivite (MSA)
- Protein ekspresyonu
- EGFP-H2B: Konum/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Ürünler
- Epidermal büyüme faktörü (EGF), çoğalmayı uyarıcı aktivite (MSA), CMV Promotor Histon H2B, Neomisin, Fosfotransferaz
06İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS, 0,5 mg/mL G418 ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Eski ortamı atın ve hücreleri PBS ile yıkayın. Taze hazırlanmış %0,025 tripsin/%0,02 EDTA çözeltisini 37 santigrat dereceye ısıtarak ekleyin ve hücreler ayrılana kadar bekleyin; bu süre genellikle yaklaşık 5 dakika sürer. Taze besiyeri ekleyerek tripsini nötralize edin, ardından hücre karışımını bir tüpe aktarın ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra süpernatantı çıkarın, hücre peletini taze kültür ortamında yeniden süspanse edin ve süspansiyonu yeni şişelere aktarın. 0,5 mg/ml nihai konsantrasyon elde etmek için kültür ortamına G418 ekleyin
- Ekim yoğunluğu
- 2 ila 4 x 104 hücre/cm2
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
08Bağışçı
- Tür / alt tür
- OsborneMendel
09Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Yasal Uyarı
- Hücrelerimiz yalnızca in vitro laboratuvar araştırma amaçları için sağlanmıştır ve klinik veya tanısal kullanım için tasarlanmamıştır, insanlara uygulanmayacak veya veterinerlik amaçları için kullanılmayacaktır. Kullanıcılar, bu hücrelerin bir araştırma ortamında işlenmesi ve kullanılmasına yönelik tüm geçerli yönergelere ve düzenlemelere uymalıdır.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Üçüncü taraf sözleşmeleri geçerlidir
- Evet
.jpg)