NRK-EGFP-H2B

La linea cellulare NRK-EGFP-H2B è una variante geneticamente modificata di cellule di rene normale di ratto (NRK) che esprime stabilmente la proteina verde fluorescente potenziata (EGFP) fusa con l'istone H2B. Questa modifica consente la visualizzazione in tempo reale della cromatina e delle dinamiche nucleari, rendendo questa linea cellulare uno strumento prezioso per lo studio della progressione del ciclo cellulare, della mitosi e dell'organizzazione della cromatina. L'espressione stabile di EGFP-H2B fornisce un segnale fluorescente brillante e costante, facilitando l'imaging ad alta risoluzione delle cellule vive e consentendo ai ricercatori di monitorare gli eventi nucleari con grande precisione.

Le cellule NRK, provenienti dal tessuto renale di un ratto adulto, sono ampiamente utilizzate in biologia cellulare grazie alle loro robuste caratteristiche di crescita e ai comportamenti fisiologici ben documentati. L'introduzione della proteina di fusione EGFP-H2B in queste cellule non altera significativamente la loro crescita o morfologia, consentendo condizioni sperimentali affidabili e riproducibili. Questa linea cellulare è particolarmente utile negli studi sulla biologia delle cellule renali, sulle risposte cellulari allo stress e sui meccanismi di carcinogenesi, dato il ruolo del rene nel filtrare il sangue e nell'espellere i rifiuti. Inoltre, le capacità di fluorescenza delle cellule NRK-EGFP-H2B possono essere sfruttate in applicazioni di screening farmacologico per osservare gli effetti dei farmaci sulla proliferazione cellulare e sulla morfologia nucleare in tempo reale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia