NRK-EGFP-H2B
Cell line · Termékszám 500724
Az NRK-EGFP-H2B sejtvonal a normál patkányvese-sejtek (NRK) genetikailag módosított változata, amely stabil módon expresszálja a fokozott zöld fluoreszcens fehérjét (...
Személyre szabás / Ajánlások
- NRK-EGFP-H2BCell line€800.00
01Általános információk
- Leírás
Az NRK-EGFP-H2B sejtvonal a normál patkányvese (NRK) sejtek genetikailag módosított változata, amely stabilan expresszálja a H2B hisztonhoz fuzionált, fokozottan zöld fluoreszkáló fehérjét (EGFP). Ez a módosítás lehetővé teszi a kromatin és a nukleáris dinamika valós idejű vizualizálását, így ez a sejtvonal felbecsülhetetlen értékű eszközzé válik a sejtciklus progressziójának, a mitózisnak és a kromatin szerveződésének tanulmányozására. Az EGFP-H2B stabil expressziója fényes és konzisztens fluoreszcens jelet biztosít, ami megkönnyíti a nagy felbontású élősejtes képalkotást, és lehetővé teszi a kutatók számára a nukleáris események nagy pontosságú nyomon követését.
A felnőtt patkányok veseszövetéből származó NRK sejteket robusztus növekedési tulajdonságaik és jól dokumentált fiziológiai viselkedésük miatt széles körben használják a sejtbiológiában. Az EGFP-H2B fúziós fehérje bevitele ezekbe a sejtekbe nem változtatja meg jelentősen növekedésüket vagy morfológiájukat, ami megbízható és reprodukálható kísérleti feltételeket tesz lehetővé. Ez a sejtvonal különösen hasznos a vesesejtek biológiájának, a stresszre adott sejtválaszoknak és a karcinogenezis mechanizmusainak tanulmányozásában, tekintettel a vese vérszűrésben és a salakanyagok kiválasztásában betöltött szerepére. Emellett az NRK-EGFP-H2B sejtek fluoreszcens képességei felhasználhatók a gyógyszer-szűrési alkalmazásokban, hogy valós időben megfigyeljék a gyógyszerek sejtproliferációra és a sejtmag morfológiájára gyakorolt hatását.
- Szövet
- Vese
- Szinonimák
- NRK EGFP-H2B
02Osztályozás
- Organizmus
- Patkány
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Fibroblaszt-szerű, fusiform alakú sejtek
04Azonosítók
- Hivatkozás
- NRK-EGFP-H2B (Cytion katalógusszám: 500724)
- NCBI adóazonosító szám
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_AV92
- Betétes
- Az Ellenberg Labor (EMBL)
05Kifejeződés és fogékonyság
- Kifejeződő receptorok
- Epidermális növekedési faktor (EGF), szaporodást serkentő aktivitás (MSA)
- Fehérjeexpresszió
- EGFP-H2B: Hely/gén: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Termékek
- Epidermális növekedési faktor (EGF), szaporodást serkentő aktivitás (MSA), CMV promotor Hiszton H2B, neomicin, foszfotranszferáz
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, 0,5 mg/ml G418-zal
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Dobja ki a régi tápfolyadékot, és mossa ki a sejteket PBS-szel. Adjunk hozzá frissen készített 0,025%-os tripszin/0,02%-os EDTA oldatot 37 Celsius-fokra melegítve, és várjuk meg, amíg a sejtek leválnak, ami általában körülbelül 5 percig tart. Semlegesítse a tripszint friss tápfolyadék hozzáadásával, majd helyezze át a sejtkeveréket egy csőbe és centrifugálja. A centrifugálás után távolítsa el a felülúszót, reszuszpendálja a sejtpelletet friss táptalajban, és a szuszpenziót helyezze át új lombikba. Adjunk a táptalajhoz G418-at, hogy 0,5 mg/ml végkoncentrációt érjünk el
- Ültetési sűrűség
- 2–4 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Faj / alfaj
- OsborneMendel
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Jogi nyilatkozat
- Sejtjeinket kizárólag in vitro laboratóriumi kutatási célokra bocsátjuk rendelkezésre, és nem szánjuk klinikai vagy diagnosztikai felhasználásra, nem adhatóak be embereknek, és nem használhatók fel állatorvosi célokra. A felhasználóknak be kell tartaniuk a sejtek kutatási környezetben történő kezelésére és felhasználására vonatkozó valamennyi vonatkozó irányelvet és előírást.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen
.jpg)