NRK-EGFP-H2B

La lignée cellulaire NRK-EGFP-H2B est une variante génétiquement modifiée de cellules rénales normales de rat (NRK) qui expriment de manière stable la protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) fusionnée à l’histone H2B. Cette modification permet la visualisation en temps réel de la chromatine et de la dynamique nucléaire, faisant de cette lignée cellulaire un outil inestimable pour l’étude de la progression du cycle cellulaire, de la mitose et de l’organisation de la chromatine. L’expression stable de l’EGFP-H2B fournit un signal fluorescent intense et constant, facilitant l’imagerie à haute résolution de cellules vivantes et permettant aux chercheurs de surveiller les événements nucléaires avec une grande précision.

Les cellules NRK, issues du tissu rénal d’un rat adulte, sont largement utilisées en biologie cellulaire en raison de leurs caractéristiques de croissance robustes et de leurs comportements physiologiques bien documentés. L’introduction de la protéine de fusion EGFP-H2B dans ces cellules n’altère pas de manière significative leur croissance ni leur morphologie, ce qui permet d’obtenir des conditions expérimentales fiables et reproductibles. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile dans les études sur la biologie des cellules rénales, les réponses cellulaires au stress et les mécanismes de carcinogenèse, compte tenu du rôle du rein dans la filtration du sang et l’excrétion des déchets. De plus, les propriétés de fluorescence des cellules NRK-EGFP-H2B peuvent être mises à profit dans des applications de criblage de médicaments afin d’observer en temps réel les effets des médicaments sur la prolifération cellulaire et la morphologie nucléaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.