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NRK-EGFP-H2B
ティッシュ
腎臓
同義語
NRK EGFP-H2B

NRK-EGFP-H2B

Cell line · 製品番号 500724

NRK-EGFP-H2B細胞株は、正常ラット腎臓(NRK)細胞を遺伝子改変したもので、強化型緑色蛍光タンパク質(...)を安定的に発現している。

€800.00税・送料別
受注生産
1

01概要

説明

NRK-EGFP-H2B細胞株は、ヒストンH2Bに融合した増強型緑色蛍光タンパク質(EGFP)を安定に発現する、正常ラット腎臓(NRK)細胞の遺伝子改変型である。この改変により、クロマチンと核の動態をリアルタイムで可視化することが可能となり、この細胞株は細胞周期の進行、有糸分裂、クロマチン構成を研究するための貴重なツールとなった。EGFP-H2Bの安定発現は、明るく一貫した蛍光シグナルを提供し、高解像度のライブセルイメージングを容易にし、研究者が核のイベントを正確にモニターすることを可能にする。

成体ラットの腎臓組織に由来するNRK細胞は、その頑強な増殖特性と十分に文書化された生理的挙動により、細胞生物学で広く用いられている。これらの細胞にEGFP-H2B融合タンパク質を導入しても、その増殖や形態に大きな変化はないため、信頼性が高く再現性の高い実験条件を得ることができる。この細胞株は、腎臓が血液を濾過し老廃物を排泄する役割を担っていることから、腎臓細胞の生物学、ストレスに対する細胞応答、発癌メカニズムの研究に特に有用である。さらに、NRK-EGFP-H2B細胞の蛍光能力は、細胞増殖や核形態に対する薬物の影響をリアルタイムで観察する薬物スクリーニングのアプリケーションに利用できる。

ティッシュ
腎臓
同義語
  • NRK EGFP-H2B

02分類

生物
ネズミ
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
房状の線維芽細胞様細胞

04識別子

引用
NRK-EGFP-H2B (Cytion カタログ番号 500724)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_AV92
預金者
エレンバーグ・ラボ(EMBL)

05発現と感受性

発現している受容体
上皮成長因子(EGF)、増殖刺激活性(MSA)
タンパク質の発現
EGFP-H2B:位置/遺伝子:1...589/Pcmv、613...1329/EGFP、1387...1764/H2B、3001...3795/KanR/NeoR
製品
上皮成長因子(EGF)、増殖刺激活性(MSA)、CMVプロモーター ヒストンH2B、ネオマイシン、リン酸化酵素

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBS、0.5 mg/mL G418を添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
古いメデュームを捨て、PBSで細胞を洗う。37℃に加温した0.025%トリプシン/0.02%EDTA溶液を加え、細胞が剥離するまで待つ。新鮮なメデュームを加えてトリプシンを中和し、細胞混合物をチューブに移し、遠心分離する。遠心後、上清を取り除き、細胞ペレットを新しい培地に懸濁し、懸濁液を新しいフラスコに移す。最終濃度が0.5 mg/mlになるようにG418を培地に混ぜる。
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
オズボーン・メンデル