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E11

Cell line · Référence du produit 400494

The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire E11 est une lignée cellulaire murine hautement spécialisée, développée pour des études avancées sur la fonction des podocytes et les mécanismes des maladies rénales. Dérivées des glomérules de souris transgéniques conçues pour exprimer une variante thermosensible de l'antigène SV40 large T, les cellules E11 fonctionnent sous la régulation du promoteur H-2kb inductible par l'IFN. Ce cadre génétique unique facilite la prolifération conditionnelle des cellules, en fonction de la température ambiante, ce qui correspond à l'expression contrôlée de l'antigène T.

L'une des caractéristiques distinctives de la lignée cellulaire E11 est sa stabilité phénotypique au cours d'un grand nombre de passages. En conservant une expression et des caractéristiques cellulaires cohérentes après plus de 40 passages, les cellules E11 se sont révélées inestimables pour les études à long terme, sans le problème courant de la dérive phénotypique observée dans de nombreuses lignées cellulaires cultivées. Cette stabilité renforce leur utilisation dans des expériences biologiques répétitives et prolongées nécessitant un comportement cellulaire cohérent.

En termes d'expression protéique, la lignée cellulaire E11 présente un profil robuste qui est essentiel pour les études spécifiques sur les podocytes. Les cellules expriment systématiquement la néphrine, un composant essentiel de la structure du diaphragme des podocytes, ainsi qu'une variété d'autres protéines spécifiques des podocytes telles que la podocine, la CD2AP et la synaptopodine. Cette expression complète des protéines facilite l'étude de la biologie des podocytes dans un environnement in vitro contrôlé, simulant étroitement les conditions in vivo. La capacité des cellules E11 à former des contacts cellule-cellule étendus souligne encore leur aptitude à modéliser les fonctionnalités de la barrière de filtration rénale.

Tissu
Rein

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Type de cellule
Podocyte

04Identifiants

Référence
E11 (numéro de catalogue Cytion 400494)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5737

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
WT1, Lmx1b, néphrine, NEPHI, FAT, P-cadhérine, CD2AP, ZO-I, podocalyxine, podoplanine, synpo, podocine, TRPC6 et GAPDH.

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

33°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
Inoculer les flacons de culture cellulaire T75 avec 1x 104 cellules/cm2 pour le processus de prolifération. Maintenir les cellules à 33 °C / 5 % de CO2 jusqu'à ce que le flacon soit confluent à environ 75 %.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Âge du donneur
Adulte