E11
Cell line · Número do produto 400494
The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...
Personalização / Recomendações
- E11Cell line€800.00
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular E11 é uma linha celular murina altamente especializada, desenvolvida para estudos avançados sobre a função dos podócitos e os mecanismos das doenças renais. Derivadas dos glomérulos de ratinhos transgénicos concebidos para exprimir uma variante sensível à temperatura do antigénio SV40 large T, as células E11 funcionam sob a regulação do promotor H-2kb induzido por IFN-g. Esta estrutura genética única facilita a proliferação condicional das células, dependente da temperatura ambiente, o que se alinha com a expressão controlada do antigénio T.
Uma das caraterísticas distintivas da linha celular E11 é a sua estabilidade fenotípica através de passagens extensivas. Mantendo uma expressão consistente e caraterísticas celulares ao longo de mais de 40 passagens, as células E11 provaram ser inestimáveis para estudos a longo prazo sem o problema comum de desvio fenotípico observado em muitas linhas de células cultivadas. Esta estabilidade aumenta a sua utilização em experiências biológicas repetitivas e prolongadas que exigem um comportamento celular consistente.
Em termos de expressão proteica, a linha celular E11 apresenta um perfil robusto que é essencial para estudos específicos de podócitos. As células expressam consistentemente a nefrina, um componente essencial da estrutura do diafragma da fenda nos podócitos, juntamente com uma variedade de outras proteínas específicas dos podócitos, como a podocina, o CD2AP e a sinaptopodina. Esta expressão proteica abrangente facilita o estudo da biologia dos podócitos num ambiente in vitro controlado, simulando de perto as condições in vivo. A capacidade das células E11 para formar contactos célula-célula extensos sublinha ainda mais a sua adequação para modelar as funcionalidades da barreira de filtração renal.
- Tecido
- Rim
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Não especificado
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Tipo de célula
- Podocitos
04Identificadores
- Referência
- E11 (número de catálogo Cytion 400494)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5737
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- WT1, Lmx1b, nefrina, NEPHI, FAT, P-caderina, CD2AP, ZO-I, podocalyxina, podoplanina, synpo, podocina, TRPC6 e GAPDH.
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
33°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- Inocule frascos de cultura celular T75 com 1x 104 células/cm² para o processo de proliferação. Mantenha as células a 33 graus Celsius / 5% de CO₂, até que o frasco esteja cerca de 75% confluente.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
- Idade do dador
- Adulto
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Aviso legal
- As nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de investigação laboratorial in vitro e não se destinam a utilização clínica ou de diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os utilizadores devem aderir a todas as diretrizes e regulamentos aplicáveis para o manuseamento e utilização destas células num ambiente de investigação.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- Aplicam-se os acordos com terceiros
- Sim
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