E11

La linea cellulare E11 è una linea cellulare murina altamente specializzata sviluppata per studi avanzati sulla funzione dei podociti e sui meccanismi delle malattie renali. Derivate dai glomeruli di topi transgenici ingegnerizzati per esprimere una variante sensibile alla temperatura dell'antigene SV40 large T, le cellule E11 funzionano sotto la regolazione del promotore H-2kb, inducibile con l'IFN. Questa struttura genetica unica facilita la proliferazione condizionale delle cellule, dipendente dalla temperatura ambientale, che si allinea con l'espressione controllata dell'antigene T.

Una delle caratteristiche distintive della linea cellulare E11 è la sua stabilità fenotipica attraverso un ampio passaggio. Mantenendo l'espressione e le caratteristiche cellulari costanti attraverso più di 40 passaggi, le cellule E11 si sono dimostrate preziose per gli studi a lungo termine senza il problema comune della deriva fenotipica che si riscontra in molte linee cellulari in coltura. Questa stabilità ne migliora l'uso in esperimenti biologici ripetitivi e prolungati che richiedono un comportamento cellulare coerente.

In termini di espressione proteica, la linea cellulare E11 presenta un profilo robusto che è la quintessenza degli studi specifici sui podociti. Le cellule esprimono costantemente la nefrina, un componente essenziale della struttura del diaframma a fessura dei podociti, insieme a una serie di altre proteine specifiche dei podociti come la podocina, il CD2AP e la sinaptopina. Questa espressione proteica completa facilita lo studio della biologia dei podociti in un ambiente controllato in vitro, che simula da vicino le condizioni in vivo. La capacità delle cellule E11 di formare ampi contatti cellula-cellula sottolinea ulteriormente la loro idoneità a modellare le funzionalità della barriera di filtrazione del rene.

33°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia