E11

Az E11 sejtvonal egy magasan specializált egérsejtvonal, amelyet a podociták működésének és a vesebetegségek mechanizmusainak fejlett vizsgálatára fejlesztettek ki. Az E11 sejtek az SV40 nagy T antigén hőmérséklet-érzékeny változatának kifejezésére módosított transzgenikus egerek glomerulusaiból származnak, és az IFN-g-indukálható H-2kb promóter szabályozása alatt működnek. Ez az egyedülálló genetikai keret megkönnyíti a sejtek feltételes, a környezeti hőmérséklettől függő proliferációját, ami összhangban van a T antigén szabályozott expressziójával.

Az E11 sejtvonal egyik megkülönböztető jellemzője a fenotípusos stabilitás a kiterjedt passzázsok során. Az E11 sejtek több mint 40 passzázson keresztül megőrzik az expresszió és a sejtjellemzők konzisztens voltát, így felbecsülhetetlen értékűnek bizonyultak a hosszú távú vizsgálatokhoz, anélkül, hogy a fenotípusos drift sok tenyésztett sejtvonalnál gyakori probléma lenne. Ez a stabilitás fokozza a sejtek felhasználását az ismétlődő és hosszan tartó biológiai kísérletekben, amelyek következetes sejtmagatartást igényelnek.

A fehérjeexpresszió tekintetében az E11 sejtvonal olyan robusztus profilt mutat, amely a podocita-specifikus vizsgálatokhoz elengedhetetlen. A sejtek következetesen expresszálják a nephrint, a podociták réses membránszerkezetének alapvető összetevőjét, számos más podocita-specifikus fehérje, például a podocin, a CD2AP és a synaptopodin mellett. Ez az átfogó fehérjeexpresszió megkönnyíti a podociták biológiájának tanulmányozását ellenőrzött in vitro környezetben, amely szorosan szimulálja az in vivo körülményeket. Az E11 sejtek azon képessége, hogy kiterjedt sejt-sejt kapcsolatokat tudnak kialakítani, tovább hangsúlyozza alkalmasságukat a vese szűrési gát funkcióinak modellezésére.

33°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban