E11

Linia komórkowa E11 jest wysoce wyspecjalizowaną mysią linią komórkową opracowaną do zaawansowanych badań nad funkcjonowaniem podocytów i mechanizmami chorób nerek. Pochodzące z kłębuszków transgenicznych myszy zaprojektowanych do ekspresji wrażliwego na temperaturę wariantu antygenu SV40 large T, komórki E11 działają pod kontrolą promotora H-2kb indukowanego IFN-g. Ta unikalna struktura genetyczna ułatwia warunkową proliferację komórek, zależną od temperatury otoczenia, co jest zgodne z kontrolowaną ekspresją antygenu T.

Jedną z wyróżniających cech linii komórkowej E11 jest jej stabilność fenotypowa podczas intensywnego pasażowania. Utrzymując stałą ekspresję i charakterystykę komórkową przez ponad 40 pasaży, komórki E11 okazały się nieocenione w długoterminowych badaniach bez powszechnego problemu dryfu fenotypowego obserwowanego w wielu hodowanych liniach komórkowych. Ta stabilność zwiększa ich wykorzystanie w powtarzalnych i rozszerzonych eksperymentach biologicznych wymagających spójnego zachowania komórek.

Pod względem ekspresji białek linia komórkowa E11 wykazuje solidny profil, który jest kwintesencją badań specyficznych dla podocytów. Komórki konsekwentnie wyrażają nefrynę, niezbędny składnik struktury membrany szczelinowej w podocytach, wraz z wieloma innymi białkami specyficznymi dla podocytów, takimi jak podocyna, CD2AP i synaptopodyna. Ta kompleksowa ekspresja białek ułatwia badanie biologii podocytów w kontrolowanym środowisku in vitro, ściśle symulującym warunki in vivo. Zdolność komórek E11 do tworzenia rozległych kontaktów komórka-komórka dodatkowo podkreśla ich przydatność do modelowania funkcji bariery filtracyjnej nerek.

33°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym