E11

E11 hücre hattı, podosit fonksiyonu ve böbrek hastalığı mekanizmalarında ileri çalışmalar için geliştirilmiş oldukça özelleşmiş bir murin hücre hattıdır. SV40 büyük T antijeninin sıcaklığa duyarlı bir varyantını ifade etmek üzere tasarlanmış transgenik farelerin glomerüllerinden türetilen E11 hücreleri, IFN-g-indüklenebilir H-2kb promotörünün düzenlemesi altında çalışır. Bu benzersiz genetik çerçeve, T antijeninin kontrollü ifadesiyle uyumlu olan çevresel sıcaklığa bağlı olarak hücrelerin koşullu çoğalmasını kolaylaştırır.

E11 hücre hattının ayırt edici özelliklerinden biri, kapsamlı pasajlama boyunca fenotipik stabilitesidir. 40'tan fazla pasaj boyunca tutarlı ifade ve hücresel özelliklerini koruyan E11 hücreleri, kültürlenmiş birçok hücre hattında görülen fenotipik kayma sorunu olmadan uzun vadeli çalışmalar için çok değerli olduğunu kanıtlamıştır. Bu kararlılık, tutarlı hücre davranışı gerektiren tekrarlayan ve genişletilmiş biyolojik deneylerde kullanımlarını artırmaktadır.

Protein ekspresyonu açısından, E11 hücre hattı podosit spesifik çalışmalar için gerekli olan sağlam bir profil sergilemektedir. Hücreler, podositlerdeki yarık diyafram yapısının temel bir bileşeni olan nefrini, podosin, CD2AP ve sinaptopodin gibi çeşitli diğer podosite özgü proteinlerin yanı sıra tutarlı bir şekilde ifade eder. Bu kapsamlı protein ifadesi, in vivo koşulları yakından taklit eden kontrollü bir in vitro ortamda podosit biyolojisinin incelenmesini kolaylaştırır. E11 hücrelerinin kapsamlı hücre-hücre temasları oluşturma kabiliyeti, böbrek filtrasyon bariyeri işlevlerini modellemek için uygunluklarının altını çizmektedir.

33°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın