E11

E11 šūnu līnija ir ļoti specializēta peļu šūnu līnija, kas izstrādāta padocītu funkcijas un nieru slimību mehānismu progresīviem pētījumiem. E11 šūnas, kas iegūtas no transgēno peļu glomeruliem, kuras ir izveidotas, lai ekspresētu SV40 lielā T antigēna temperatūras jutīgu variantu, darbojas ar IFN-g inducējama H-2kb promotora regulāciju. Šī unikālā ģenētiskā struktūra veicina šūnu nosacītu proliferāciju atkarībā no vides temperatūras, kas atbilst T antigēna kontrolētai ekspresijai.

Viena no E11 šūnu līnijas atšķirīgajām iezīmēm ir tās fenotipiskā stabilitāte plašas pasāžas laikā. Saglabājot nemainīgu ekspresiju un šūnu īpašības vairāk nekā 40 pasāžu laikā, E11 šūnas ir izrādījušās nenovērtējamas ilgtermiņa pētījumos bez fenotipa novirzes, kas raksturīga daudzām kultivētām šūnu līnijām. Šī stabilitāte uzlabo to izmantošanu atkārtotos un ilgstošos bioloģiskos eksperimentos, kuros nepieciešama konsekventa šūnu uzvedība.

Olbaltumvielu ekspresijas ziņā E11 šūnu līnija uzrāda stabilu profilu, kas ir būtisks podocītu specifiskiem pētījumiem. Šūnas konsekventi ekspresē nefrīnu, kas ir būtiska podocītu diafragmas struktūras sastāvdaļa, kā arī dažādus citus podocītiem specifiskus proteīnus, piemēram, podocīnu, CD2AP un sinaptopodīnu. Šī visaptverošā proteīnu ekspresija atvieglo podocītu bioloģijas izpēti kontrolētā in vitro vidē, kas precīzi imitē in vivo apstākļus. E11 šūnu spēja veidot plašus šūnu-šūnu kontaktus vēl vairāk uzsver to piemērotību nieru filtrācijas barjeras funkciju modelēšanai.

33°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu