Перейти до вмісту
E11
Тканина
Нирка

Документи

E11

Cell line · Номер товару 400494

The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія E11 - це високоспеціалізована лінія мишачих клітин, розроблена для поглибленого вивчення функції подоцитів та механізмів розвитку захворювань нирок. Отримані з клубочків трансгенних мишей, сконструйованих для експресії термочутливого варіанту великого Т-антигену SV40, клітини E11 функціонують під регуляцією IFN-g-індукованого промотора H-2kb. Ця унікальна генетична структура сприяє умовній проліферації клітин, залежній від температури навколишнього середовища, що узгоджується з контрольованою експресією Т-антигену.

Однією з відмінних рис клітинної лінії E11 є її фенотипічна стабільність при тривалому пасажуванні. Підтримуючи постійну експресію і клітинні характеристики протягом більш ніж 40 пасажів, клітини E11 виявилися безцінними для довгострокових досліджень, не піддаючись фенотипічному дрейфу, характерному для багатьох культивованих клітинних ліній. Ця стабільність розширює можливості їх використання в повторюваних і тривалих біологічних експериментах, що вимагають стабільної поведінки клітин.

З точки зору експресії білків, клітини лінії E11 демонструють надійний профіль, який є квінтесенцією для досліджень, специфічних для подоцитів. Клітини постійно експресують нефрин, важливий компонент структури щілинної діафрагми в подоцитах, а також ряд інших специфічних для подоцитів білків, таких як подоцин, CD2AP і синаптоподин. Така комплексна експресія білків полегшує вивчення біології подоцитів у контрольованому середовищі in vitro, що наближається до умов in vivo. Здатність клітин E11 утворювати широкі міжклітинні контакти ще більше підкреслює їхню придатність для моделювання функцій фільтраційного бар'єру нирок.

Тканина
Нирка

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Не вказано
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Тип клітини
Подоцит

04Ідентифікатори

Посилання
E11 (номер за каталогом Cytion 400494)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_5737

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
WT1, Lmx1b, нефрін, NEPHI, FAT, P-кадгерин, CD2AP, ZO-I, подокаліксин, подопланін, synpo, подоцин, TRPC6 і GAPDH.

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

33°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Засейте колби з культурою клітин T75 з щільністю 1x 104 клітин/см2 для процесу проліферації. Зберігайте клітини при температурі 33 градуси Цельсія / 5% CO2, доки колба не буде заповнена приблизно на 75%.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Вік донора
Дорослий