E11

Lini sel E11 adalah lini sel murin yang sangat terspesialisasi yang dikembangkan untuk penelitian lanjutan dalam fungsi podosit dan mekanisme penyakit ginjal. Berasal dari glomerulus tikus transgenik yang direkayasa untuk mengekspresikan varian antigen T besar SV40 yang peka terhadap suhu, sel E11 beroperasi di bawah regulasi promotor H-2kb yang dapat diinduksi oleh IFN-g. Kerangka kerja genetik yang unik ini memfasilitasi proliferasi bersyarat sel, tergantung pada suhu lingkungan, yang selaras dengan ekspresi antigen T yang terkendali.

Salah satu ciri khas dari garis sel E11 adalah stabilitas fenotipiknya di seluruh lintasan yang luas. Mempertahankan ekspresi yang konsisten dan karakteristik seluler melalui lebih dari 40 lintasan, sel E11 telah terbukti sangat berharga untuk studi jangka panjang tanpa masalah umum pergeseran fenotipik yang terlihat pada banyak garis sel yang dikultur. Stabilitas ini meningkatkan penggunaannya dalam eksperimen biologis yang berulang dan diperpanjang yang membutuhkan perilaku sel yang konsisten.

Dalam hal ekspresi protein, garis sel E11 menunjukkan profil yang kuat yang sangat penting untuk studi spesifik podosit. Sel-sel tersebut secara konsisten mengekspresikan nephrin, komponen penting dari struktur diafragma celah pada podosit, di samping berbagai protein spesifik podosit lainnya seperti podocin, CD2AP, dan synaptopodin. Ekspresi protein yang komprehensif ini memfasilitasi studi biologi podosit dalam lingkungan in vitro yang terkendali, yang secara dekat mensimulasikan kondisi in vivo. Kemampuan sel E11 untuk membentuk kontak sel-sel yang luas semakin menggarisbawahi kesesuaiannya untuk memodelkan fungsi penghalang filtrasi ginjal.

33°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami