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E11
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E11

Cell line · 제품 번호 400494

The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...

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사용자 지정 / 추천 사항

주문 제작
1

01일반 정보

설명

E11 세포주는 족세포 기능 및 신장 질환 메커니즘에 대한 고급 연구를 위해 개발된 고도로 전문화된 쥐 세포주입니다. SV40 대형 T 항원의 온도에 민감한 변형을 발현하도록 조작된 형질전환 마우스의 사구체에서 추출한 E11 세포는 IFN-g 유도성 H-2kb 프로모터의 조절에 따라 작동합니다. 이 독특한 유전적 프레임워크는 환경 온도에 따라 세포의 조건부 증식을 촉진하며, 이는 T 항원의 발현이 제어되는 것과 일치합니다.

E11 세포주의 두드러진 특징 중 하나는 광범위한 통과에 걸쳐 표현형 안정성을 보인다는 점입니다. 40회 이상의 통과를 통해 일관된 발현과 세포 특성을 유지하는 E11 세포는 많은 배양 세포주에서 흔히 나타나는 표현형 편차 문제 없이 장기 연구에 매우 유용하다는 것이 입증되었습니다. 이러한 안정성은 일관된 세포 동작이 필요한 반복적이고 장기적인 생물학적 실험에서 활용도를 높여줍니다.

단백질 발현 측면에서 E11 세포주는 족세포 특이적 연구에 전형적인 강력한 프로파일을 보여줍니다. 이 세포는 포도세포의 슬릿 다이어프램 구조의 필수 구성 요소인 네프린과 포도신, CD2AP, 시냅토딘과 같은 다양한 다른 포도세포 특이 단백질과 함께 일관되게 발현합니다. 이러한 포괄적인 단백질 발현은 생체 내 조건을 밀접하게 시뮬레이션하여 통제된 시험관 환경에서 족세포 생물학 연구를 용이하게 합니다. E11 세포가 광범위한 세포 간 접촉을 형성하는 능력은 신장 여과 장벽 기능을 모델링하는 데 적합하다는 것을 더욱 강조합니다.

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신장

02분류

생물체
마우스
성
미지정
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

세포 유형
포도상구균

04식별자

인용
E11(사이티온 카탈로그 번호 400494)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_5737

05발현 및 감수성

단백질 발현
WT1, Lmx1b, 네프린, 네피, FAT, P-카데린, CD2AP, ZO-I, 포도칼릭신, 포도플라닌, 신포, 포도신, TRPC6 및 GAPDH.

06취급 및 배양

배지
RPMI 1640, w: 2.0mM 안정 글루타민, w: 2.0g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820700a)
배양 조건

33°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
증식 과정을 위해 T75 세포 배양 플라스크에 1x 10⁴ 세포/cm²로 접종합니다. 플라스크가 약 75% 접합될 때까지 세포를 섭씨 33도 / 이산화탄소 5% 조건에서 유지합니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
기증자 연령
성인