E11

La línea celular E11 es una línea celular murina altamente especializada desarrollada para estudios avanzados sobre la función podocitaria y los mecanismos de las enfermedades renales. Derivadas de los glomérulos de ratones transgénicos diseñados para expresar una variante sensible a la temperatura del antígeno SV40 T grande, las células E11 funcionan bajo la regulación del promotor H-2kb inducible por IFN-g. Este marco genético único facilita la proliferación condicional de las células en función de la temperatura ambiental, lo que permite realizar estudios avanzados sobre la función podocitaria y los mecanismos de la enfermedad renal. Este marco genético único facilita la proliferación condicional de las células, dependiente de la temperatura ambiental, que se alinea con la expresión controlada del antígeno T.

Una de las características distintivas de la línea celular E11 es su estabilidad fenotípica a lo largo de extensos pasajes. Al mantener una expresión y unas características celulares constantes durante más de 40 pases, las células E11 han demostrado ser muy valiosas para estudios a largo plazo sin el problema común de la deriva fenotípica que se observa en muchas líneas celulares cultivadas. Esta estabilidad mejora su uso en experimentos biológicos repetitivos y prolongados que requieren un comportamiento celular constante.

En cuanto a la expresión de proteínas, la línea celular E11 presenta un perfil robusto que es esencial para estudios específicos de podocitos. Las células expresan sistemáticamente nefrina, un componente esencial de la estructura del diafragma de hendidura en los podocitos, junto con una variedad de otras proteínas específicas de podocitos como podocina, CD2AP y sinaptopodina. Esta completa expresión de proteínas facilita el estudio de la biología podocitaria en un entorno in vitro controlado, que simula fielmente las condiciones in vivo. La capacidad de las células E11 para formar extensos contactos célula-célula subraya aún más su idoneidad para modelar las funcionalidades de la barrera de filtración renal.

33°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía