E11
Cell line · Productnummer 400494
The E11 cell line is a highly specialized murine cell line developed for advanced studies in podocyte function and kidney disease mechanisms. Derived from...
Maatwerk / Aanbevelingen
- E11Cell line€800.00
01Algemene informatie
- Beschrijving
De E11-cellijn is een zeer gespecialiseerde muriene cellijn die is ontwikkeld voor geavanceerd onderzoek naar de podocytenfunctie en mechanismen van nieraandoeningen. De E11 cellen zijn afgeleid van de glomeruli van transgene muizen die een temperatuursgevoelige variant van het SV40 groot T-antigeen tot expressie brengen. Ze werken onder de regulatie van de IFN-g-induceerbare H-2kb promotor. Dit unieke genetische kader vergemakkelijkt de conditionele proliferatie van de cellen, afhankelijk van de omgevingstemperatuur, wat overeenkomt met de gecontroleerde expressie van het T-antigeen.
Een van de onderscheidende kenmerken van de E11 cellijn is de fenotypische stabiliteit bij uitgebreide passaging. E11-cellen hebben een consistente expressie en cellulaire karakteristieken gedurende meer dan 40 passages en zijn daardoor van onschatbare waarde gebleken voor langetermijnstudies zonder het veelvoorkomende probleem van fenotypische drift dat bij veel gekweekte cellijnen optreedt. Deze stabiliteit verbetert hun gebruik in herhaalde en uitgebreide biologische experimenten die consistent celgedrag vereisen.
Op het gebied van eiwitexpressie vertoont de E11 cellijn een robuust profiel dat essentieel is voor podocyt-specifieke studies. De cellen brengen consequent nephrine tot expressie, een essentieel onderdeel van de spleetmembraanstructuur in podocyten, naast een verscheidenheid aan andere podocyt-specifieke eiwitten zoals podocine, CD2AP en synaptopodine. Deze uitgebreide eiwitexpressie vergemakkelijkt de studie van podocytenbiologie in een gecontroleerde in vitro omgeving, die de omstandigheden in vivo nauwkeurig nabootst. Het vermogen van E11 cellen om uitgebreide cel-cel contacten te vormen onderstreept verder hun geschiktheid voor het modelleren van nierfiltratie barrière functionaliteiten.
- Weefsel
- Nieren
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Niet gespecificeerd
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This Immorto Mouse podocyte line contains a temperature‑sensitive SV40 T‑antigen construct enabling conditional immortalization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Celtype
- Podocyten
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- E11 (Cytion catalogusnummer 400494)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_5737
05Expressie en vatbaarheid
- Eiwit-expressie
- WT1, Lmx1b, nephrin, NEPHI, FAT, P-cadherine, CD2AP, ZO-I, podocalyxine, podoplanine, synpo, podocine, TRPC6 en GAPDH.
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
33°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Zaaidichtheid
- Inoculeer T75-celkweekflessen met 1x 104 cellen/cm2 voor het proliferatieproces. Houd de cellen op 33 graden Celsius / 5% CO2, totdat de fles voor ongeveer 75% confluent is.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
- Leeftijd van de donor
- Volwassen
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Disclaimer
- Onze cellen worden uitsluitend geleverd voor in vitro laboratoriumonderzoek en zijn niet bedoeld voor klinisch of diagnostisch gebruik, noch mogen ze worden toegediend aan mensen of worden gebruikt voor veterinaire doeleinden. Gebruikers moeten zich houden aan alle toepasselijke richtlijnen en voorschriften voor het hanteren en gebruiken van deze cellen in een onderzoeksomgeving.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja
.jpg)