E11

E11-solulinja on pitkälle erikoistunut hiirisolulinja, joka on kehitetty podosyyttien toiminnan ja munuaissairauksien mekanismien kehittyneisiin tutkimuksiin. E11-solut ovat peräisin sellaisten siirtogeenisten hiirten glomeruleista, jotka on muunnettu ilmentämään SV40 large T -antigeenin lämpötilaherkkää muunnosta, ja ne toimivat IFN-g-indusoituvan H-2kb-promoottorin ohjaamina. Tämä ainutlaatuinen geneettinen kehys helpottaa solujen ehdollista lisääntymistä, joka riippuu ympäristön lämpötilasta ja vastaa T-antigeenin hallittua ilmentymistä.

Yksi E11-solulinjan erityispiirteistä on sen fenotyyppinen stabiilius laajojen passagointien aikana. E11-solut ovat säilyttäneet yhtenäisen ilmentymisen ja soluominaisuudet yli 40 passage-käytön ajan, ja ne ovat osoittautuneet korvaamattomiksi pitkäaikaistutkimuksissa ilman monissa viljellyissä solulinjoissa esiintyvää fenotyyppistä ajautumista. Tämä vakaus parantaa niiden käyttöä toistuvissa ja pitkäkestoisissa biologisissa kokeissa, jotka edellyttävät solujen johdonmukaista käyttäytymistä.

Proteiiniekspression osalta E11-solulinjalla on vankka profiili, joka on välttämätön podosyyttispesifisissä tutkimuksissa. Solut ilmentävät johdonmukaisesti nefriiniä, joka on olennainen osa podosyyttien raon kalvorakennetta, sekä useita muita podosyyttispesifisiä proteiineja, kuten podosiinia, CD2AP:tä ja synaptopodiinia. Tämä kattava proteiiniekspressio helpottaa podosyyttien biologian tutkimista kontrolloidussa in vitro -ympäristössä, joka simuloi läheisesti in vivo -olosuhteita. E11-solujen kyky muodostaa laajoja solu-solukontakteja korostaa entisestään niiden soveltuvuutta munuaissuodatusesteen toimintojen mallintamiseen.

33 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa