E11

E11-cellelinjen er en høyspesialisert murin cellelinje som er utviklet for avanserte studier av podocyttfunksjon og mekanismer ved nyresykdom. E11-cellene stammer fra glomeruli fra transgene mus som er konstruert for å uttrykke en temperatursensitiv variant av SV40 large T-antigenet, og de reguleres av den IFN-g-induserbare H-2kb-promotoren. Dette unike genetiske rammeverket legger til rette for betinget spredning av cellene, avhengig av omgivelsestemperaturen, noe som samsvarer med det kontrollerte uttrykket av T-antigenet.

Et av de viktigste kjennetegnene ved E11-cellelinjen er dens fenotypiske stabilitet gjennom omfattende passering. E11-celler har opprettholdt et konsistent uttrykk og cellulære egenskaper gjennom mer enn 40 passeringer, noe som har vist seg å være uvurderlig for langtidsstudier uten det vanlige problemet med fenotypisk drift som man ser i mange dyrkede cellelinjer. Denne stabiliteten gjør at de kan brukes i gjentatte og langvarige biologiske eksperimenter som krever konsistent celleatferd.

Når det gjelder proteinuttrykk, har E11-cellelinjen en robust profil som er helt avgjørende for podocyttspesifikke studier. Cellene uttrykker konsekvent nefrin, som er en viktig komponent i podocyttenes spaltestruktur, sammen med en rekke andre podocyttspesifikke proteiner som podocin, CD2AP og synaptopodin. Dette omfattende proteinuttrykket gjør det mulig å studere podocyttenes biologi i et kontrollert in vitro-miljø, som i stor grad etterligner in vivo-forhold. E11-cellenes evne til å danne omfattende celle-celle-kontakter understreker ytterligere deres egnethet for modellering av nyrenes filtreringsbarrierefunksjoner.

33 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring