HL-1

HL-1 est une lignée cellulaire de muscle cardiaque dérivée des cardiomyocytes auriculaires d'une souris adulte. Cette lignée cellulaire est unique en ce sens qu'elle conserve la capacité de se contracter et de maintenir un phénotype cardiaque différencié au cours d'une culture à long terme, ce qui en fait un modèle inestimable pour la recherche cardiovasculaire. Les cellules HL-1 sont largement utilisées dans les études portant sur la physiologie, l'électrophysiologie et la pharmacologie cardiaques. Leur capacité à subir des contractions spontanées et inductibles permet aux chercheurs d'étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la fonction du muscle cardiaque, les maladies et la réponse aux agents thérapeutiques.

Les cellules HL-1 présentent des caractéristiques typiques des cellules musculaires cardiaques, notamment l'expression de marqueurs spécifiques du muscle cardiaque tels que la troponine, la myosine et la connexine 43. Elles réagissent à divers stimuli physiologiques et pharmacologiques, ce qui permet d'étudier en détail les voies de transduction des signaux cardiaques, la fonction des canaux ioniques et les effets des médicaments sur les cellules cardiaques. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile pour modéliser les arythmies cardiaques, l'hypertrophie et d'autres pathologies cardiaques. En outre, les cellules HL-1 sont utilisées dans des essais de criblage de médicaments à haut débit visant à identifier les composés qui modulent la fonction cardiaque, ce qui est crucial pour le développement de nouveaux traitements des maladies cardiovasculaires.

Milieu Claycomb, 2 mM de glutamine, 10 % de FBS, 0,1 mM de norépinéphrine dans de l'acide L-ascorbique (produit non disponible à la vente)

Préparez une solution de 0,1 mM de norépinéphrine dans de l'acide L-ascorbique :

Préparez une solution mère 100 fois plus concentrée = 10 mM de norépinéphrine.

1. Préparez une solution d'acide L-ascorbique à 30 mM (50 mL)

2. Ajoutez 160 mg de norépinéphrine à la solution d’acide L-ascorbique (50 ml) = 10 mM de norépinéphrine

3. Filtrer la solution de manière stérile à l'aide d'une cartouche filtrante de 0,2 µm.

4. Transvasez des aliquotes de 1 ml de la solution mère de norépinéphrine 100 fois concentrée dans des flacons stériles et conservez-les à −20 °C. Enveloppez-les dans du papier d'aluminium ; ils doivent être protégés de la lumière. La solution est stable pendant environ 1 mois à −20 °C.

5. Ajouter 1 ml de cette solution à 100 ml de milieu Claycomb. Le milieu n’est stable que pendant 1 mois.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

Les flacons de culture cellulaire doivent être enduits de fibronectine et de gélatine. On place 25 µg de fibronectine, dissous dans 2 ml d'une solution aqueuse de gélatine à 0,02 %, dans un flacon T25, puis on incube le tout pendant une nuit à 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie