HL-1

HL-1 on sydänlihassolulinja, joka on peräisin aikuisen hiiren eteisen sydänlihassoluista. Tämä solulinja on ainutlaatuinen, sillä se säilyttää kykynsä supistua ja ylläpitää erilaistunutta sydänfenotyyppiä pitkäaikaisessa viljelyssä, mikä tekee siitä korvaamattoman mallin sydän- ja verisuonitutkimukselle. HL-1-soluja käytetään laajalti sydämen fysiologiaan, elektrofysiologiaan ja farmakologiaan keskittyvissä tutkimuksissa. Niiden kyky spontaaneihin ja indusoitaviin supistuksiin antaa tutkijoille mahdollisuuden selvittää sydänlihaksen toiminnan, sairauksien ja hoitokeinoihin reagoinnin taustalla olevia molekyylimekanismeja.

HL-1-soluilla on sydänlihassoluille tyypillisiä ominaisuuksia, mukaan lukien sydämen spesifisten merkkiaineiden, kuten troponiinin, myosiinin ja konneksiini 43:n, ilmentyminen. Ne reagoivat erilaisiin fysiologisiin ja farmakologisiin ärsykkeisiin, mikä mahdollistaa sydämen signaalinsiirtoreittien, ionikanavien toiminnan sekä lääkkeiden vaikutusten sydänsoluihin koskevat yksityiskohtaiset tutkimukset. Tämä solulinja on erityisen arvokas sydämen rytmihäiriöiden, hypertrofian ja muiden sydänsairauksien mallintamisessa. Lisäksi HL-1-soluja käytetään suurikapasiteettisissa lääkeaineiden seulontatesteissä, joiden tarkoituksena on tunnistaa sydämen toimintaa sääteleviä yhdisteitä, mikä on ratkaisevan tärkeää uusien sydän- ja verisuonitautien hoitomuotojen kehittämiselle.

Claycomb-kasvatusliuos, 2 mM glutamiinia, 10 % FBS:ää, 0,1 mM norepinefriiniä L-askorbiinihapossa (Emme myy tätä tuotetta)

Valmista 0,1 mM norepinefriiniä L-askorbiinihapossa:

Valmista 100-kertainen kantaliuos = 10 mM norepinefriiniä.

1. Valmista 30 mM:n L-askorbiinihappoliuos (50 ml)

2. Lisää 160 mg norepinefriiniä askorbiinihappoliuokseen (50 ml) = 10 mM norepinefriiniä

3. Suodata liuos steriilisti 0,2 µm:n suodatinpatruunan läpi.

4. Täytä 1 ml:n alikvootit 100-kertaisesta norepinefriinin kantaliuoksesta steriileihin pulloihin ja säilytä −20 °C:ssa. Kääri alumiinifolioon; liuos on suojattava valolta. Liuos on stabiili noin 1 kuukauden ajan −20 °C:ssa.

5. Lisää 1 ml tätä liuosta 100 ml:aan Claycomb-kasvatusainetta. Kasvatusaine on stabiili vain yhden kuukauden ajan.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

Soluviljelypullot on päällystettävä fibronektiinillä ja gelatiinilla. 25 µg fibronektiiniä, liuotettuna 2 ml:aan 0,02-prosenttista gelatiiniliuosta vedessä, laitetaan T25-pulloon ja inkuboidaan yön yli 37 °C:ssa.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa