HL-1

A HL-1 é uma linhagem celular do músculo cardíaco derivada dos cardiomiócitos atriais de um camundongo adulto. Essa linhagem celular é única, pois mantém a capacidade de se contrair e de preservar um fenótipo cardíaco diferenciado durante a cultura de longo prazo, o que a torna um modelo inestimável para pesquisas cardiovasculares. As células HL-1 são amplamente utilizadas em estudos voltados para a fisiologia cardíaca, eletrofisiologia e farmacologia. Sua capacidade de sofrer contrações espontâneas e induzíveis permite que os pesquisadores investiguem os mecanismos moleculares subjacentes à função do músculo cardíaco, às doenças e à resposta a agentes terapêuticos.

As células HL-1 apresentam características típicas das células do músculo cardíaco, incluindo a expressão de marcadores específicos do coração, como troponina, miosina e conexina 43. Elas respondem a vários estímulos fisiológicos e farmacológicos, possibilitando estudos detalhados das vias de transdução de sinais cardíacos, da função dos canais iônicos e dos efeitos de medicamentos nas células cardíacas. Essa linhagem celular é particularmente valiosa para a modelagem de arritmias cardíacas, hipertrofia e outras patologias cardíacas. Além disso, as células HL-1 são utilizadas em ensaios de triagem de medicamentos de alto rendimento, com o objetivo de identificar compostos que modulam a função cardíaca, o que é crucial para o desenvolvimento de novos tratamentos para doenças cardiovasculares.

Meio Claycomb, 2 mM de glutamina, 10% de FBS, 0,1 mM de norepinefrina em ácido L-ascórbico (Não comercializamos)

Prepare 0,1 mM de norepinefrina em ácido L-ascórbico:

Prepare uma solução-mãe 100 vezes mais concentrada = 10 mM de norepinefrina.

1. Prepare uma solução de ácido L-ascórbico a 30 mM (50 mL)

2. Adicione 160 mg de norepinefrina à solução de ácido ascórbico (50 mL) = 10 mM de norepinefrina

3. Filtre a solução de forma estéril por meio de um cartucho de filtro de 0,2 µm.

4. Encha frascos estéreis com alíquotas de 1 mL da solução-mãe de norepinefrina 100 vezes concentrada e armazene a −20 °C. Envolva em papel-alumínio; deve ser protegida da luz. A solução é estável por aproximadamente 1 mês a −20 °C.

5. Adicione 1 mL dessa solução a 100 mL de meio Claycomb. O meio permanece estável por apenas 1 mês.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Os frascos de cultura celular devem ser revestidos com fibronectina e gelatina. Colocam-se 25 µg de fibronectina, dissolvidos em 2 ml de gelatina a 0,02% em água, em um frasco T25 e incubam-se durante a noite a 37 °C

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.