HL-1

HL-1 to linia komórek mięśnia sercowego pochodząca z kardiomiocytów przedsionkowych dorosłej myszy. Ta linia komórkowa jest wyjątkowa, ponieważ zachowuje zdolność do kurczenia się i utrzymywania zróżnicowanego fenotypu serca podczas długotrwałej hodowli, co czyni ją nieocenionym modelem do badań nad układem sercowo-naczyniowym. Komórki HL-1 są szeroko stosowane w badaniach koncentrujących się na fizjologii serca, elektrofizjologii i farmakologii. Ich zdolność do poddawania się spontanicznym i indukowanym skurczom pozwala naukowcom badać mechanizmy molekularne leżące u podstaw funkcji mięśnia sercowego, chorób i odpowiedzi na środki terapeutyczne.

Komórki HL-1 wykazują cechy typowe dla komórek mięśnia sercowego, w tym ekspresję markerów specyficznych dla serca, takich jak troponina, miozyna i connexin 43. Reagują na różne bodźce fizjologiczne i farmakologiczne, umożliwiając szczegółowe badania szlaków transdukcji sygnału sercowego, funkcji kanałów jonowych i wpływu leków na komórki serca. Ta linia komórkowa jest szczególnie cenna w modelowaniu arytmii serca, przerostu i innych patologii serca. Ponadto, komórki HL-1 są wykorzystywane w wysokowydajnych testach przesiewowych leków mających na celu identyfikację związków modulujących czynność serca, co ma kluczowe znaczenie dla rozwoju nowych metod leczenia chorób sercowo-naczyniowych.

Pożywka Claycomba, 2 mM glutaminy, 10% FBS, 0,1 mM norepinefryny w kwasie L-askorbinowym (nie prowadzimy sprzedaży)

Przygotować 0,1 mM norepinefryny w kwasie L-askorbinowym:

Przygotować 100-krotny roztwór podstawowy = 10 mM norepinefryny.

1. Przygotować roztwór kwasu L-askorbinowego o stężeniu 30 mM (50 ml)

2. Dodać 160 mg noradrenaliny do roztworu kwasu askorbinowego (50 ml) = 10 mM noradrenaliny

3. Przefiltrować roztwór sterylnie przez wkład filtrujący o wielkości porów 0,2 µm.

4. Napełnij sterylne fiolki 1-mililitrowymi porcjami 100-krotnego roztworu podstawowego norepinefryny i przechowuj w temperaturze −20 °C. Owiń folią aluminiową; należy chronić przed światłem. Roztwór jest stabilny przez około 1 miesiąc w temperaturze −20 °C.

5. Do 100 ml pożywki Claycomba dodać 1 ml tego roztworu. Pożywka zachowuje stabilność jedynie przez 1 miesiąc.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

Kolby do hodowli komórkowej należy pokryć fibronektyną i żelatyną. 25 µg fibronektyny, rozpuszczonej w 2 ml 0,02% roztworu żelatyny w wodzie, umieszcza się w kolbie T25 i inkubuje przez noc w temperaturze 37°C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym