HL-1

HL-1 is een hartspiercellijn afkomstig van de atriale cardiomyocyten van een volwassen muis. Deze cellijn is uniek omdat ze het vermogen behoudt om samen te trekken en een gedifferentieerd hartfenotype op lange termijn te behouden, waardoor ze een model van onschatbare waarde is voor cardiovasculair onderzoek. HL-1 cellen worden veel gebruikt in studies gericht op cardiale fysiologie, elektrofysiologie en farmacologie. Dankzij hun vermogen om spontane en induceerbare contracties te ondergaan, kunnen onderzoekers de moleculaire mechanismen onderzoeken die ten grondslag liggen aan de hartspierfunctie, ziekte en de respons op therapeutische middelen.

HL-1 cellen vertonen karakteristieken die typisch zijn voor hartspiercellen, waaronder de expressie van hart-specifieke markers zoals troponine, myosine en connexine 43. Ze reageren op verschillende fysiologische en farmacologische factoren. Ze reageren op verschillende fysiologische en farmacologische stimuli, waardoor gedetailleerde studies van cardiale signaaltransductiepaden, ionkanaalfunctie en de effecten van medicijnen op hartcellen mogelijk zijn. Deze cellijn is bijzonder waardevol voor het modelleren van hartritmestoornissen, hypertrofie en andere cardiale pathologieën. Daarnaast worden HL-1 cellen gebruikt in high-throughput drug screening assays gericht op het identificeren van verbindingen die de hartfunctie moduleren, wat cruciaal is voor de ontwikkeling van nieuwe behandelingen voor hart- en vaatziekten.

Claycomb-medium, 2 mM glutamine, 10% FBS, 0,1 mM norepinefrine in L-ascorbinezuur (Dit product is niet bij ons verkrijgbaar)

Bereid 0,1 mM norepinefrine in L-ascorbinezuur:

Bereid een 100-voudige stockoplossing = 10 mM norepinefrine.

1. Bereid een 30 mM L-ascorbinezuuroplossing (50 mL)

2. Voeg 160 mg norepinefrine toe aan de ascorbinezuuroplossing (50 mL) = 10 mM norepinefrine

3. Filter de oplossing steriel door een filterpatroon van 0,2 µm.

4. Vul aliquots van 1 mL van de 100-voudige norepinefrine-stockoplossing in steriele flesjes en bewaar deze bij −20 °C. Wikkel ze in aluminiumfolie; ze moeten tegen licht worden beschermd. De oplossing is bij −20 °C ongeveer 1 maand stabiel.

5. Voeg 1 mL van deze oplossing toe aan 100 mL Claycomb-medium. Het medium is slechts 1 maand houdbaar.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

De celkweekflessen moeten worden gecoat met fibronectine en gelatine. 25 µg fibronectine, opgelost in 2 ml 0,02% gelatine in water, wordt in een T25-fles gedaan en een nacht bij 37 °C geïncubeerd.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring