HL-1

HL-1 est une lignée cellulaire de muscle cardiaque dérivée des cardiomyocytes auriculaires d’une souris adulte. Cette lignée cellulaire se distingue par sa capacité à se contracter et à conserver un phénotype cardiaque différencié au cours d’une culture à long terme, ce qui en fait un modèle inestimable pour la recherche cardiovasculaire. Les cellules HL-1 sont largement utilisées dans les études portant sur la physiologie cardiaque, l’électrophysiologie et la pharmacologie. Leur capacité à subir des contractions spontanées et induites permet aux chercheurs d’étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents à la fonction du muscle cardiaque, aux maladies cardiaques et à la réponse aux agents thérapeutiques.

Les cellules HL-1 présentent les caractéristiques typiques des cellules du muscle cardiaque, notamment l’expression de marqueurs spécifiques au cœur tels que la troponine, la myosine et la connexine 43. Elles réagissent à divers stimuli physiologiques et pharmacologiques, ce qui permet d’étudier en détail les voies de transduction des signaux cardiaques, le fonctionnement des canaux ioniques et les effets des médicaments sur les cellules cardiaques. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile pour la modélisation des arythmies cardiaques, de l’hypertrophie et d’autres pathologies cardiaques. De plus, les cellules HL-1 sont utilisées dans des essais de criblage de médicaments à haut débit visant à identifier des composés qui modulent la fonction cardiaque, ce qui est crucial pour le développement de nouveaux traitements contre les maladies cardiovasculaires.

Milieu Claycomb, 2 mM de glutamine, 10 % de FBS, 0,1 mM de norépinéphrine dans de l’acide L-ascorbique (produit non disponible à la vente)

Préparez une solution de 0,1 mM de norépinéphrine dans de l’acide L-ascorbique :

Préparez une solution mère 100 fois plus concentrée = 10 mM de norépinéphrine.

1. Préparez une solution d’acide L-ascorbique à 30 mM (50 mL)

2. Ajouter 160 mg de norépinéphrine à la solution d’acide L-ascorbique (50 mL) = 10 mM de norépinéphrine

3. Filtrer la solution de manière stérile à l’aide d’une cartouche filtrante de 0,2 µm.

4. Verser des aliquotes de 1 mL de la solution mère de norépinéphrine 100 fois concentrée dans des flacons stériles et les entreposer à −20 °C. Envelopper dans du papier d’aluminium; la solution doit être protégée de la lumière. La solution est stable pendant environ 1 mois à −20 °C.

5. Ajouter 1 mL de cette solution à 100 mL de milieu Claycomb. Le milieu n’est stable que pendant 1 mois.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

Les flacons de culture cellulaire doivent être enduits de fibronectine et de gélatine. On verse 25 µg de fibronectine, dissous dans 2 ml d’une solution aqueuse de gélatine à 0,02 %, dans un flacon T25, puis on incube le tout pendant une nuit à 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.