HL-1

HL-1 je celična linija srčne mišice, pridobljena iz predsrčnih kardiomiocitov odrasle miši. Ta celična linija je edinstvena, saj ohranja sposobnost krčenja in ohranja diferenciran srčni fenotip tudi med dolgotrajnim gojenjem, kar jo naredi neprecenljiv model za raziskave na področju kardiovaskularne medicine. Celice HL-1 se pogosto uporabljajo v študijah, osredotočenih na srčno fiziologijo, elektrofiziologijo in farmakologijo. Njihova sposobnost spontanih in inducibilnih krčenj omogoča raziskovalcem preučevanje molekularnih mehanizmov, ki so osnova delovanja srčne mišice, bolezni in odziva na terapevtska sredstva.

Celice HL-1 kažejo značilnosti, tipične za celice srčne mišice, vključno z izražanjem srčno specifičnih markerjev, kot so troponin, miosin in koneksin 43. Odzivajo se na različne fiziološke in farmakološke dražljaje, kar omogoča podrobne študije poti prenosa signalov v srcu, delovanja ionskih kanalov ter učinkov zdravil na srčne celice. Ta celična linija je še posebej dragocena za modeliranje srčnih aritmij, hipertrofije in drugih srčnih patologij. Poleg tega se celice HL-1 uporabljajo v testih za presejanje zdravil z visoko zmogljivostjo, namenjenih identifikaciji spojin, ki modulirajo srčno delovanje, kar je ključnega pomena za razvoj novih načinov zdravljenja kardiovaskularnih bolezni.

Claycombovo gojišče, 2 mM glutamina, 10 % FBS, 0,1 mM norepinefrina v L-askorbinski kislini (tega ne prodajamo)

Pripravite 0,1 mM norepinefrina v L-askorbinski kislini:

Pripravite 100-kratno osnovno raztopino = 10 mM norepinefrina.

1. Pripravite 30 mM raztopino L-askorbinske kisline (50 mL)

2. K raztopini askorbinske kisline (50 mL) dodajte 160 mg norepinefrina = 10 mM norepinefrina

3. Raztopino sterilno filtrirajte skozi 0,2-µm filtrirni vložek.

4. 1-mL alikvote 100-kratne osnovne raztopine norepinefrina nalijte v sterilne viale in shranite pri −20 °C. Ovijte v aluminijasto folijo; raztopino je treba zaščititi pred svetlobo. Raztopina je stabilna približno 1 mesec pri −20 °C.

5. 1 mL te raztopine dodajte v 100 mL Claycombovega gojišča. Gojišče je stabilno le 1 mesec.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

Posode za celične kulture morajo biti prevlečene s fibronektinom in želatino. 25 µg fibronektina, raztopljenega v 2 ml 0,02-odstotne raztopine želatine v vodi, se vlije v posodo T25 in inkubira čez noč pri 37 °C.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo